У ребенка клебсиелла что это
Klebsiella pneumoniae (клебсиелла пневмонии)
Клебсиелла пневмонии (лат. Klebsiella pneumoniae) — вид грамотрицательных факультативно-анаэробных условно-патогенных бактерий. Входит в состав нормальной микрофлоры кишечника, кожи, ротовой полости человека. Имеет вид небольшой округлой палочки размером 0,5–0,8 на 1–2 мкм. Klebsiella pneumoniae не образует спор, неподвижна, способна к образованию капсул. Располагаются одиночно, попарно и скоплениями.
Klebsiella pneumoniae в ЖКТ человека
Klebsiella pneumoniae колонизирует кишечник современного человека в первые 5–6 дней жизни, причем основным источником Klebsiella pneumoniae являются мать и персонал родильных домов. Обнаружение Klebsiella pneumoniae в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) человека, в общем случае, не требует лечения. У здорового человека в 1 г кала насчитывается до 10 5 Klebsiella pneumoniae.
Причиной клебсиеллеза органов ЖКТ может быть дисбактериоз или заражение от больных инфекционной формой клебсиеллеза. Болезнь проявляется в форме острого гастрита, гастродуоденита, кишечной инфекции и характеризуется острым началом, тошнотой, рвотой, болями в животе, поносом, повышением температуры и общей слабостью. Продолжительность клебсиеллеза органов ЖКТ — 1–5 дней.
Klebsiella pneumoniae — причина внутрибольничных инфекций
Klebsiella pneumoniae и инфекции мочевыводящих путей и половой сферы
Klebsiella pneumoniae — один из распространенных возбудителей инфекционных заболеваний мочевыводящих путей. В отличие от ЖКТ или кожи, для мочевыводящих путей Klebsiella pneumoniae всегда является патогенным микроорганизмом. Среди обращающихся за амбулаторной помощью пациентов с неосложненными инфекционными заболеваниями мочевыводящих путей причиной инфекции в 6,4 % случаев является Klebsiella pneumoniae. Для пациентов с осложненными инфекционными заболеваниями мочевыводящих путей эта цифра достигает 9,4 %. Klebsiella pneumoniae в мочеполовых путях часто является следствием внутрибольничных инфекций.
Клебсиелла пневмонии может встречаться во влагалищной микрофлоре, в частности, после приёма антибиотиков, результатом которого было уничтожение нормальной микрофлоры влагалища. Клебсиелла пневмонии в мочеполовых путях часто является следствием внутрибольничных инфекций.
Клебсиелла риносклеромы
Клебсиелла озены
Лечение клебсиеллезов
Для лечения клебсиеллезов обычно применяются антибиотики. Также используются лекарственные препараты, действующим веществом которого являются бактериофаги (Бактериофаг клебсиелл пневмонии очищенный жидкий, Секстафаг и др.). Бактериофаги действуют избирательно, не имеют противопоказаний, но они менее эффективны, чем антибиотики.
Антибактериальные средства, активные в отношении Klebsiella pneumoniae (из имеющих описание в данном справочнике): левофлоксацин, норфлоксацин, офлаксацин, а также гентамицин, нафтифин и другие.
Klebsiella pneumoniae устойчива к клотримазолу.
Klebsiella pneumoniae в систематике бактерий
Вид Klebsiella pneumoniae входит в род клебсиелла (лат. Klebsiella), семейство энтеробактерии (лат. Enterobacteriaceae), порядок энтеробактерии (лат. Enterobacteriales), класс гамма-протеобактерии (лат. γ proteobacteria), тип протеобактерии (лат. Proteobacteria), царство бактерии.
Устаревшее название Klebsiella pneumoniae — палочка Фридлендера. Карл Фридлендер (нем. Carl Friedländer, 1847–1887) — немецкий микробиолог, выделивший чистую культуру Klebsiella pneumoniae в 1882 году.
Первоначально Klebsiella pneumoniae была определена, как микроорганизм вызывающий пневмонию (отсюда и ее название). Однако её роль не сводится только к инфекциям респираторной системы. В общем случае Klebsiella pneumoniae классифицируется как условно-патогенный микроб, находящийся в нормальной ситуации и в определенных органах в симбиотическом отношении с человеческим организмом, а в иных ситуациях являющийся причиной инфекционных заболеваний.
Клебсиелла у детей
Клебсиеллезная инфекция известна также как клебсиеллез или клебсиелла (по названию возбудителя) — группа инфекционных болезней, которые вызываются условно-патогенными микроорганизмами, широко распространенными у новорожденных и детей раннего возраста.
Клебсиеллы часто вызывают внутрибольничные вспышки. У детей болезнь в основном возбуждает К. pneumoniae. К ней очень чувствительны новорожденные и младенцы. Способствуют развитию заболевания гипотрофия и врожденные пороки сердца, недоношенность, ОРВИ, иммунодефицитные состояния. Клебсиеллы вызывают групповую и спорадическую заболеваемость, приблизительно равную во всех сезонах.
Что провоцирует / Причины Клебсиеллы у детей:
Клебсиеллы являются грамотрицательными неподвижными капсульными палочками. Их размер 0,3—1,5×0,6—6 мкм. Располагаются по одиночке, парами или группируясь короткими цепочками. На питательных средах при температуре 35—37 ˚С наблюдается рост клебсиелл, которые формируют слизистые блестящие колонии, похожие на купола.
Обработка бактерицидным мылом зачастую не убивает возбудителя клебсиеллезной инфекции. То же касается и дезинфицирующих средств.
Болезнь у человека возбуждают три вида клебсиелл: К. pneumoniae, К. rhino-scleromatis и К. ozaenae.
Патогенез (что происходит?) во время Клебсиеллы у детей:
Некоторые штаммы К. pneumoniae производят довольно сильный энтеротоксин, который вызывает в разных органах и системах тяжелые морфологические изменения. Данный энтеротоксин приводит к диссеминированному внутрисосудистому свертыванию.
В то же время в области первичных очагов быстро образуются иммунные комплексы, которые оказывают на ткани патогенное влияние. Энтеротоксин приводит к гемодинамическим нарушениям в очагах поражения: в бронхиальной ткани, в стенке кишечника. В легких под влиянием энтеротоксина происходит разложение сурфактанта и образование ателектазов.
Симптомы Клебсиеллы у детей:
Клебсиелла у детей бывает таких видов:
Это деление по локализации патологического процесса.
Клебсиеллезная пневмония известна также как пневмония Фридлендера. По симптоматике они похожа на пневмонии другой бактериальной природы – на пневмококковую, например. Болезнь имеет острое начало, температура тела достигает примерно 39 °С, но может быть и выше. Ребенка знобит, появляется кашель (упорный, с отделением кровянисто-слизистой вязкой мокроты).
Аускультация показывает ослабление дыхания над воспалительными очагами и влажные хрипы. С помощью рентгена выявляют мелкоочаговые, крупноочаговые, захватывающие несколько сегментов, а также долевые пневмонии. Течение болезни в основном тяжелое. Клебсиеллезная пневмония в большинстве случаев сочетается с другими инфекциями – например, респираторно-вирусными.
При клебсиеллезной пневмонии патологический процесс переходит на альвеолы, наблюдается экссудация с геморрагическим компонентом. Пневмония имеет склонность к абсцедированию; есть случаи, при которых развивается гангрена легкого.
Клебсиеллезная кишечная инфекция по симптоматике и течению сходна с гастроэнтероколитом, энтероколитом, гастроэнтеритом и энтеритом. Начало заболевания характеризуется повышением температуры до уровня 37—39 °С, рвотой или повторными срыгиваниями (у младенцев), жидким стулом. Стул имеет обильный, водянистый характер, оттенок желто-зеленый, в испражнениях наблюдаются непереваренные частицы пищи. У 10—12% больных детей в испражнениях бывает кровяная примесь.
От детей могут поступать жалобы на боли в животе, которые имеют приступообразный характер. У младенцев и дошкольников родители наблюдают приступы беспокойства, которые усиливаются при пальпации живота.
На протяжении 2-12 дней держится высокая температура (в среднем от 3 жо 5 суток). В первые 2-3 суток болезни у ребенка случается рвота 2-8 раз на протяжении дня и ночи. Далее рвота либо прекращается либо случается довольно редко. От 3 до 10 суток длится диарея. Частота стула зависит от каждого конкретного случая. Иногда стул случается около 20 раз.
Тяжелые формы заболевания происходят с развитием токсикоза с эксикозом на протяжении 3-6 дней. У половины заболевших детей наблюдается выраженность обезвоживания II степени. Рвота почти во всех случаях повторяется, случается от 3 до 7 раз за день и ночь.
Фиксируют такие симптомы:
Изменений паренхиматозных органов нет, нейротоксикоза нет. В периферической крови – умеренный лейкоцитоз, в половине случаев бывает нейтрофилез и в трети случаев фиксируют повышенную СОЭ (до 15—20 мм/ч). Кишечная инфекция вызывается множеством штаммов клебсиелл.
Особенности заболевания у новорожденных и детей 1-го года жизни. Болезнь, как правило, проявляется у детей недоношенных с явлениями пренатальной дистрофии и энцефалопатии. Инфекция может поражать разные органы и системы, но превалируют кишечная инфекция и пневмония.
Кишечная инфекция у грудничков имеет острое начало, бурно развивается кишечный синдром, гемодинамические и метоболические нарушения. Дети отказываются сосать грудь, родители замечают их вялость и срыгивания. Стул у младенцев в данном случае происходит от 8 до 20 раз в сутки. Испражнения жидкой консистенции, водянистые, желто-зеленого оттенка, есть примесь мутной слизи. У некоторых заболевших малышей кишечные расстройства проявляются недолгосрочным учащением и разжижением стула.
Большинство новорожденных, заболевших клебсиеллезом, находятся в тяжелом состоянии. За первые несколько суток болезни они теряют значительный процент массы тела (100-500 г) из-за токсикоза с дегидратацией. Кожа приобретает серовато-бледный оттенок, возникает выраженный периоральный и периорбитальный цианоз, а также адинамия, гипорефлексия, заторможенность.
Энтероколит может быть некротизирующим, из-за этого в стуле появляется кровь и возникают осложнения – перфорация кишечника. Из-за присоединения пневмонии случается дыхательная недостаточность. Когда кишечная инфекция сочетается с пневмонией, на первый план среди симптомов выходит нейротоксикоз. У детей проявляются такие симптомы клебсиеллеза:
Могут случаться такие осложнения:
В периферической крови у новорожденных и грудничков наблюдаются лейкоцитоз и гиперлейкоцитоз (35 х 10 9 /л) с появлением миелоцитов до 3—7%, а также умеренная анемия.
У новорожденных клебсиеллы могут размножаться в первую очередь на коже головы в месте прикрепления электродов для мониторного наблюдения, на участках повреждения акушерскими щипцами и в области гематомы. Развивается инфильтративно-некротический процесс вплоть до развития флегмоны и абсцессов.
Клебсиеллезный сепсис часто поражает костную и суставную ткани. Симптоматически это проявляется как припухлость припухлостью в области воспаления ткани или сустава, ограниченное движение пораженной конечности, резкое беспокойство малыша при пеленании. Температура тела в норме. Обычно патологический процесс локализуется в области бедренной, плечевой и болыпеберцовой костей.
Диагностика Клебсиеллы у детей:
Для постановки диагноза необходимо обнаружение возбудителя или обнаружение нарастания титра антител к аутоштамму. Используют бактериологические методы исследования испражнений, рвотных масс, крови, мокроты, отделяемого из воспалительных очагов на коже и видимых слизистых оболочках, мочи. Диагностическое значение имеют выделение клебсиелл от больного в количестве 10 6 микробных тел и более в 1 г фекалий и снижение количества бактерий по мере выздоровления ребенка. Вспомогательную роль играет нарастание титров антител каутоштамму клебсиеллы в процессе болезни. Титры противоклебсиеллезных агглютининов колеблются от 1:20 до 1:80 или от 1:8 до 1:64.
Лечение Клебсиеллы у детей:
Для лечения необходима правильная диета и своевременная оральная регидратация. Для лечения среднетяжелых и тяжелых форм болезни необходимы антибактериальные препараты. Врачи назначают обычно гентамицин (антибиотик группы аминогликозидов широкого спектра действия), нитрофурановые препараты, 5-НОК (препарат группы оксихинолинов).
Профилактика Клебсиеллы у детей:
Для предотвращения заражения клебсиеллами нужно строго соблюдать противоэпидемичесий режим в родильных домах, в соматических и хирургических стационарах, в отделениях для новорожденных. Активную профилактику проводят с помощью клебсиеллезной бесклеточной вакцины, оказывающей протективное действие в отношении различных сероваров К. pneumoniae.
К каким докторам следует обращаться если у Вас Клебсиелла у детей:
Клебсиелла
Темой нынешнего разговора будет, с точки зрения автора, королева внутрибольничных инфекций любого стационара — Klebsiella pneumonia (или палочка Фридлендера).
Автор: Трубачева Е.С., врач – клинический фармаколог
Темой нынешнего разговора будет, с точки зрения автора, королева внутрибольничных инфекций любого стационара — Klebsiella pneumoniae (или палочка Фридлендера). Да-да, автор не ошибся, именно она, а не синегнойки или ацинетки, а именно ее величество — клебсиелла, практически абсолютная убийца тяжелых и крайне тяжелых пациентов. Почему это именно так, мы сегодня и поговорим.
Микробиологические аспекты
Первое и главное, о чем надо знать, — Klebsiella pneumonia — это представитель нормальной микрофлоры кишечника. Еще раз и большими буквами — НОРМАЛЬНОЙ! Не надо ее там лечить (как и стафилококк в носоглотке) — она там живет, и это ее естественный ареал обитания.
А все остальные локации, где она может быть обнаружена: нижние дыхательные пути, мочевыводящий тракт, секрет простаты или содержимое полости матки (анальный сексуальный акт без презерватива — зло, имейте это в виду при сборе анамнеза, особенно у женщин с послеродовым эндометритом, автор такого навидался в достатке… мужчин это тоже касается, и обнаружение подобной зверюшки в секрете простаты должно навести на определенные мысли и вопросы, и пока пациент не закончит данную практику, простатит вы ему при всем желании не вылечите), кровь и в раны при раневых инфекциях после хирургического вмешательства на брюшной полости — могут указывать на возбудителя текущего состояния.
Что вызывает:
Общим у всех этих патологий является одно — они все тем или иным образом связаны с вмешательством, и чаще всего (опуская уже упомянутые анальные сексуальные акты) это вмешательство носит ятрогенный характер. Клебсиелла не умеет ни летать, ни ходить, ни даже ползать, в очаг ее приносят либо неправильно вымытые руки, либо плохо обработанное медицинское оборудование.
Эпидемиологические аспекты
Как мы уже обсуждали в статье о синегнойной палочке, при некотором желании и упертости эпидемиологической службы или клинического фармаколога (или команды из оных, так как каждый знает свое звено), извести неферментеров из стационара — не самая сложная задача. Было бы желание у администрации этим заняться. Что касается лечащих врачей и среднего персонала, то это тот случай, когда достаточно обработать перчатки и далее, на уровне ЦСО и утилизации отходов, правильно избавиться от контаминированого материала, и если инструментарий не одноразовый, то очистить и простерилизовать его. То есть даже на уровне обработанных (или стерильных) перчаток, касающихся только одной области пациента (другая область, если необходимо, требует смены перчаток, либо обработки рук с полным выдерживанием экспозиции, а не чуть-чуть антисептиком помазал-растер-побежал), вы уже снижаете риск контаминации оным зверьем с последующим развитием синегнойной инфекции. Про ацинетобактер будет отдельная глава в разделе «неферментеры».
С клебсиеллой все намного сложнее. Эта, не побоюсь громкого слова, зверища, живет в кишечниках всего персонала медицинских учреждений. И в первую очередь, как понятно из ее названия, поражает нижние дыхательные пути. А если персонал работает с антибиотиками, то клебсиелла еще и устойчивая ко всему арсеналу применяемых препаратов (это к вопросу о разумном ограничении доступа к препаратам резерва). Так как сама клебсиелла не имеет ножек и крылышек, то попадает в оные пути она двумя способами: или в случае аспирации, или на руках персонала и с оборудования. Иного не дано. При аспирации это будет личная дикая зверюшка пациента, в случае грязных шаловливых ручек или оборудования (например, эндоскопов) — клебсиелла, высеваемая в отделении в процессе микробиологического мониторинга. А если этот мониторинг углубленный, то напрямую покажет, какая именно хрюшка, выйдя из туалетной комнаты, не соизволила помыть руки, понадеявшись на перчатки. И нет, перчатки, даже стерильные в данном случае, не спасают, они не презерватив. Руки надо мыть и обрабатывать правильно, обязательно соблюдая технологию и экспозицию.
Как вы понимаете, истребить медицинский персонал мы не можем, поэтому и полностью очистить стационар от данной проблемы не получится. И она обязательно выскочит, стоит на секунду расслабиться, и выскочит на самом тяжелом больном, где еще умудрится смутировать в такого урода, которого не достанешь никаким антибиотиком.
На общемировом клебсиеллу тоже очень сильно боятся, и когда в 2010 году вдруг в Великобритании обнаружили штамм NDM (он устойчив вообще ко всему набору существующих антибиотиков и обозван абсолютным убийцей), паника была знатной. В результате проведенного эпидемиологического расследования, по итогам которого большая группа видных ученых стала персонами non-grata в Индии, было установлено, что данный штамм привезен оттуда и из Пакистана. Присутствие в сточных водах возбудителей, имеющих карбапенемазы (то есть это уже не внутрибольничная флора, это то, что там живет на улице) на момент проведения расследования составляла 90% по CTX-M15 и 36% по NDM. С чем связан сей факт? С безрецептурным масштабным использованием карбапенемов и… проблемами с проточной канализацией. Ее либо нет, либо ей не пользуются, а делают все по старинке. А так как земной шар оказался очень маленьким, теперь NDM-штаммы обнаруживаются по всей планете. У нас, например, очень быстро данным штаммом заселились клиники Санкт-Петербурга. И медицина перед ними бессильна. До тех пор, пока не налажен эпиднадзор, а персонал не моет руки после каждого посещения туалета.
Так как любого врага надо знать в лицо, то наиболее часто встречаемые портреты у автора тоже есть.
Итак, дикая и ничем ни разу не пуганная клебсиелла выглядит вот так:
Где встречается? Те самые послеродовые эндометриты, как результат плотских утех, простатиты, а также раневые инфекции после оперативных вмешательств на брюшной полости у ранее не леченных пациентов.
— вы можете увидеть устойчивый внутрибольничный штамм, который еще можно чем-то полечить, но это будет тяжело и дорого, проще персонал научить руки мыть и бороды брить (фекальной микрофлоры в мужских бородах в таком достатке, что единственный вариант для тех, кто хоть как-то соприкасается с ранами, данное украшение не носить или не оперировать).
На следующей картинке:
— мы видим практически неубиваемого зверя, который сам по себе вбивает тот самый последний гвоздь в гроб пациента. Но как же Тигециклин, спросите вы. Отвечу — тигацил является бактериостатиком, и пока он наберет необходимую силу, пациента уже отнесут и закопают. Но даже это еще не предел. Предел на следующем рисунке, и нет, Имипенем при указанной MIC уже бессилен:
Как вы понимаете — эти два зверя являются абсолютными убийцами, против которых в данный момент медицина бессильна полностью. И именно такое зверье живет в стационарах без микробиологического мониторинга и систем противостояния в виде эпидемического надзора. Именно эти звери убивают самых тяжелых пациентов, если каким-то образом (руки персонала или плохо обработанное оборудование) в них попали. Но что хуже всего, эти штаммы способны передавать свои факторы устойчивости другой грамотрицательной флоре, например, кишечным палочкам, а потому пациенты, инфицированные такими клебсиеллами, должны быть полностью изолированы и карантинизированы. Спасти их, скорее всего, не получится, но хотя бы всех остальных оградите от инфицирования и последующего летального исхода, да и сами такую зверюшку не подцепите (как вы помните «врач — это диагноз», так не будем его себе усложнять).
Чем лечить?
Дикая клебсиелла отлично лечится препаратами группы цефалоспоринов третьего ряда.
А вот внутрибольничную можно побороть, только четко понимая, с чем вы имеете дело, и обычный диско-дифузионный метод диагностики тут не поможет. Нужны автоматизированные системы с определением MIC. Но во главе угла все равно стоит инфекционная безопасность пациентов. Коллеги! Автор понимает, что выглядит «городской сумасшедшей», коим в свое время был объявлен Земмельвейс, но он вас умоляет — мойте руки после посещения туалета и мойте их правильно. Вам это ничего не стоит, а пациенты выживут. Ничего более эффективного против внутрибольничных клебсиелл пока не придумано. А эпидемиологи ваших учреждений будут проводить свои работы по контролю и дезинфекции отделений и целых зданий. Так получилось, что именно эту королеву ВБИ мы, врачи, медсестры и младший персонал, носим исключительно в себе. Берегите себя, своих близких и своих пациентов, тем более в это нелегкое для отечественной медицины время, с угрозой введения врачебных статей в УК. Клебсиелла — это почти всегда чистая ятрогения. Повторюсь — берегите себя и мойте руки.
У ребенка клебсиелла что это
Дисбиотические нарушения в настоящее время широко распространены в России и за рубежом. Особенно часто встречается дисбиоз кишечника, от которого, по данным различных исследователей, в той или иной степени страдает до 90 % населения страны [1]. Самым многочисленным как по видовому разнообразию, так и в количественном отношении является ассоциативный симбиоз микробных сообществ толстого кишечника [3]. У детей первого года жизни с высокой частотой и в этиологически значимых количествах выделяются клебсиеллы и золотистый стафилококк, что делает этот возраст уязвимым для развития эндогенных гнойно-воспалительных процессов различной локализации [2]. Микробиоценоз кишечника характеризуется неустойчивостью, связанной с микробной сукцессией при формировании микробиоты, особенностями иммунной системы, неадекватным иммунным ответом организма на заселение кишечника УПМ [1; 3]. Однако мало изученными остаются вопросы, связанные с распространенностью и взаимодействием генетических маркеров патогенности среди клебсиелл и стафилококков, персистирующих совместно в кишечном биотопе. Низкая эффективность эмпирического использования антибиотиков в сочетании с их побочным иммуносупрессивным эффектом приводит к подавлению нормальной микрофлоры кишечника и последующим формированием дисбиозов. Среди альтернативных антимикробных препаратов особый интерес представляют бактериофаги. В то время как антибиотики воздействуют на широкий спектр бактерий, в том числе и на нормальную микрофлору, бактериофаги обладают выраженной специфичностью [6].
Цель исследования. Оценить патогенный потенциал аутоштаммов Klebsiella spp. в ассоциации со Staphylococcus aureus, изолированных от детей первого года жизни с дисбиозами кишечника посредством детекции генетических детерминант патогенности.
Материалы и методы исследования
Были исследованы копрологические пробы 100 детей первого года жизни, у которых на основании микробиологических критериев был установлен дисбиоз кишечника с индикацией клебсиелл в диагностически значимых концентрациях (≥104 КОЕ/г) [8]. Исследуемая выборка была разделена на две группы: группа 1 – 60 детей, у которых аутоштаммы клебсиелл выделялись в монокультуре; группа 2 – 40 детей, у которых клебсиеллы вегетировали в ассоциации с золотистым стафилококком. Антибиотикорезистентность клебсиелл определяли диско-диффузионным методом [7]. Использовались антибиотические препараты (АБП) следующих групп: β-лактамы (амоксициллин, цефтазидим, ампициллин, цефотаксим), аминогликозиды (амикацин), хинолоны (норфлоксацин). Фагочувствительность определялась к коммерческим препаратам бактериофагов – «очищенному фагу клебсиелл пневмонии», «очищенному бактериофагу клебсиелл поливалентному» и «пиобактериофагу поливалентному» («Секстафаг») производства НПО «Микроген» г. Пермь. Тестирование проводилось согласно [4]. Бактериологический анализ содержимого толстой кишки производили согласно [8] и в соответствии с утвержденными методическими рекомендациями. Выделенные микроорганизмы идентифицировали общепринятыми методами [1]. Всего для ПЦР детекции факторов патогенности использовали 140 проб, где в группе 1 были типированы 60 проб с Klebsiella spp., а в группе 2 – по 40 проб Klebsiella spp. и Staphylococcus aureus. Для выделения ДНК бактерий из культуральной среды использовали комплект реагентов «ДНК-сорб-В» (ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Россия). Типирование проводили с шестью парами праймеров [2], отобранных согласно рекомендациям [5; 9; 10].
Для ПЦР-амплификации использовали коммерческий набор AmpliSens-200-1 (ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Россия). ПЦР проводили с ДНК-матрицы (3 мкл), прямого и обратного праймеров (1 мкл). ДНК амплифицировали в соответствии с протоколом [2]. Электрофорез ПЦР-фрагментов ДНК клебсиелл проводили с использованием 1,0 %-го агарозного геля в 1 % трис-ацетатном буфере в течение 60 мин при 100 В, окрашивали бромистым этидием (1%) и просматривали с помощью УФ-просвечивания. Выделенные гены были идентифицированы и определены на основе размера фрагмента ДНК продукта [2] при его соответствии с длиной маркерного фрагмента. Исследования проводились в течение 2012–2014 гг. Для статистической обработки результатов использовали Excel из пакета MS Office 2003.
Результаты исследования
и их обсуждение
В обследованной группе детей первого года жизни Klebsiella spp. была выделена в 60 % случаев, в том числе в ассоциации с золотистым стафилококком – в 40 %. Также был выявлен микроэкологический дисбаланс, который характеризовался дефицитом бифидобактерий (63,1±4,8), лактобацилл (6,8±2,5), нормальной кишечной палочки (11,7±3,2) на фоне высокой плотности бактерий рода Klebsiella (>104 КОЕ/г). В мазках 60 % аутоштаммов клебсиелл имели плотную полисахаридную капсулу, которая способствовала усилению гидрофобности клеточной стенки и препятствует проникновению фагов и АБП в клетку. Клебсиеллы чаще встречались в ассоциациях с Enterococcus spp. (78,6±4,1), Staphylococcus aureus (40,8±4,9); реже – с E. coli со слабой ферментативной активностью (26,2±4,4), Clostridium spp. (25,2±4,3) и грибами рода Candida (15,5±3,6). Далее по частоте убывания регистрировались E.coli с гемолитической активностью (13,6±3,4), коагулазонегативные виды стафилококка (4,9±2,2), Proteus spp. (3,0±1,7), Enterobacter spp. (2,0±1,4), Citrobacter frendii (2,0±1,4).
Установлено, что исследуемые штаммы клебсиелл (n=100) были чувствительны практически ко всем тестируемым антибиотикам. Процент штаммов чувствительных к β-лактамным антибиотикам составлял 85±3,5 % (цефтазидим), 83±3,8 % (амоксициллин), 89±3,1 % (цефотаксим). Исключение составил ампициллин, к которому были резистентны 70±4,5 % штаммов. Полученные данные подтверждают факт природной устойчивости клебсиелл к ампициллину. Также был высок процент штаммов чувствительных к амикацину и норфлоксацину (по 92±2,7 % случаев соответственно).
Результаты чувствительности штаммов Klebsiella spp. (n=156) к коммерческим препаратам бактериофагов представлены в табл. 1.
Характеристика чувствительности аутоштаммов Klebsiella spp к бактериофагам, (%)