Уровень экспрессии ki 67 что значит
Блог: рак молочной железы
Высокий KI 67 это приговор?
ПРЕМИЯ «БУДЕМ ЖИТЬ» ЗА ВКЛАД В БОРЬБУ ПРОТИВ РАКА:
Ki 67 — это белок-антиген, который присутствует в злокачественной опухолевой клетке. Еще его называют индексом пролиферации опухоли. Как это понять и что это такое?
Почему отводится такое большое значение этому показателю? Я попытаюсь объяснить это вам, дорогие женщины. Иногда можно проследить анамнез развития опухоли: в некоторых случаях опухоль может расти годами в груди и никак не проявляться, женщина выполняет методы обследования и на данных методах обследования опухоль не проявляется или находится в неизменном состоянии, но есть случаи, когда опухоль вырастает на глазах у пациента за очень короткий срок, растет быстро, массивно, поражая другие органы и может быть непосильна для лечения.
В чем же дело? Для этого много причин, одна из которых индекс (маркер) Ki 67, который показывает, что опухолевая клетка делится быстро или медленно. Если данный показатель высокий, это значит, что опухоль агрессивная, делится быстро, а значит и растет быстро, поэтому риск распространения опухоли высок и опухоль, скорее всего, выросла за несколько месяцев и далее будет быстро расти. Если индекс пролиферации низкий, то опухоль менее агрессивная, делится медленно и соответственно риск распространения данной опухоли невысокий.
Также опухоль с высоким Ki 67 очень агрессивно реагирует на внешние факторы, делится быстрее, напротив опухоли с низким уровнем Ki 67 ведут себя спокойно в отношении внешних факторов и могут находиться в «спящем» состоянии долгое время и не расти и не распространяться в отдаленные органы.
Раковая опухоль в зависимости от агрессивности до 0,5 см вырастает от 2 до 22 лет.
Считается, что уровень Ki 67 c показанием 20-30% является пограничным. Уровень Ki 67 до 20% считается низким и данные опухоли ведут себя менее агрессивно и при планировании лечения таким пациентам при оценке всех факторов обычно химиотерапия не назначается.
Опухоли с Ki 67 более 30% считаются уже активно размножающимися и требуют активного лечения и проведения химиотерапии. Такие опухоли более чувствительны к проведению химиотерапии и одним из этапов лечения рака молочной железы является назначение химиотерапии.
Необходимо так же сказать, что существует определенная зависимость между уровнем индекса пролиферации Ki 67 и возможной будущей прогрессии опухоли. Чем выше уровень данного показателя, тем выше возможная прогрессия опухоли в течение 5 лет. Это не говорит о том, что это обязательно случится. Назначенная химиотерапия понижает возможность прогрессии в течении 5 лет. Опухоли с высоким уровнем Ki 67 подвергаются более агрессивному лечению и применяются специальные схемы химиотерапии, чтобы общая выживаемость была удовлетворительной и ремиссия была длительной. Также хочется отметить, что высокий уровень индекса пролиферации не говорит о том, что пациент может погибнуть в течение 3-х лет. Это не так, существует статистика, которая говорит о том, что очень много случаев, когда после проведенного лечения при высоком KI 67 у пациента наступает длительная ремиссия.
Дорогие женщины, если у вас высокий KI 67, то не надо опускать руки, потому что это не приговор! Не зацикливайтесь на этих цифрах! Не мешайте своему лечению негативным настроем! Соблюдайте все рекомендации и в конечном итоге вы успешно пройдете лечение и у Вас будет длительная ремиссия.
Кi67 при раке молочной железы: 30 лет и старше
Наиболее часто рак молочной железы диагностируется после сорока лет, но встречаются более ранние случаи заболевания – в подростковом возрасте, в возрасте 20-30 лет. Исследования на рак проводятся с помощью специальных тестов. Кi67 – это белок, который служит маркером разрастания тканей опухоли при делении клеток. Во время проведения исследований Кi67 обнаруживают только в делящихся клетках. Белок Кi67 указывается в процентах – чем больше процентное содержание, тем выше пролиферативная активность опухоли. Высокое содержание белка указывает на высокий риск метастазирования новообразования, рецидива заболевания. Тест с помощью Кi67 проводят при подозрении на рак молочной железы и другие злокачественные опухоли.
В онкологической клинике Юсуповской больницы пациентки с подозрением на рак молочной железы могут получить консультацию опытного врача-онколога, пройти обследование, лечение заболевания. Онкологическое отделение оснащено современным диагностическим оборудованием, которое позволяет диагностировать рак на ранней стадии развития. Врач направляет пациентку на проведение определенных тестов и анализов. В больнице проводят лечение с помощью химиотерапии, радиотерапии, лучевой терапии. Маркер Ki67 помогает вовремя определить риск развития рецидива – опухоль может появиться в других органах, в области операционного шва, в лимфатических узлах. Показатель белка при развитии рецидива указывает на особенности опухолевого процесса – если процентный показатель белка выше, чем в первичной опухоли, то вторичная опухоль считается агрессивным новообразованием.
Норма
Наиболее применяемым иммуногистохимическим тестом считается тест на определение белка Кi67, являющегося антигеном в ядре клеток во всех циклах, кроме GO. Определение процентного содержания белка позволяет своевременно выявлять развитие риска рецидива рака молочной железы, заменять препараты химиотерапии, которые не показывают высокой эффективности. Исследования на процентное содержание белка проводится на материалах опухоли взятых с помощью биопсии. Ki 67 невозможно определить при обыкновенном гистологическом исследовании, такие исследования выполняются при проведении диагностики во время деления клеток. Диагностическое исследование назначают при подозрении на высокую агрессивность опухоли, для контроля опухолевого процесса и выявления риска рецидива, для выбора эффективного лечения новообразования. Показатели нормы белка говорят о благоприятном прогнозе заболевания.
Прогноз
Рак молочной железы – это распространенное заболевание, которое очень часто связано с повышенной гормональной активностью организма женщины. Период полового созревания, беременности, кормления грудью, предклимактерический – это периоды активного воздействия гормонов на железистую ткань груди, характеризующиеся изменениями в тканях молочной железы. Такие же изменения в тканях может вызывать длительное лечение большими дозами гормонов, отсутствие беременности у женщин старше 35 лет, бесплодие.
Ежегодно следует проходить осмотр у врача гинеколога женщинам до 35 лет, женщинам старше 35 лет следует посещать гинеколога два раза в год. Раз в год женщины старше 40 лет должны проходить маммографическое исследование. При появлении симптомов неблагополучия: изменения цвета и структуры кожи груди, втянутости соска, боли, дискомфорта следует посетить врача-маммолога или онколога. В Юсуповской больнице пациентки смогут пройти все необходимые исследования. В онкологическом отделении проводится диагностика злокачественных заболеваний молочной железы, лечение и реабилитация больных.
Уровень экспрессии ki 67 что значит
ИГХ, иммуногистохимическое исследование ткани, исследование образца опухолевой ткани, исследование ткани опухоли.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Локализация б/м: образец ткани (биоптат) опухолевого образования любой локализации.
Общая информация об исследовании
Антиген Ki-67 представляет собой специфический белок, находящийся в ядерном материале опухолевой клетки, и является необходимым для осуществления ее пролиферации, т.е. деления. Обнаружение Ki-67 указывает на опухолевые клетки, которые находятся в фазе деления клеточного цикла. Это позволяет понять, насколько активно и быстро происходит деление опухолевых клеток, а следовательно, и скорость роста новообразования, оценить риск метастазирования, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее, прогнозом заболевания.
Считается, что выявление маркера Ki-67 наиболее показательно при раке молочной железы, однако ряд исследований доказывает целесообразность проведения анализа при раке любой локализации, при подозрении на злокачественный процесс, а также при наличии доброкачественных новообразований с оценкой риска их озлокачествления.
Совместное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого материала позволяет сначала получить морфологическое описание процесса, а затем определить его пролиферативную активность – степень и скорость деления клеток. Это дает достаточно точную и объективную оценку степени злокачественности опухоли и прогноз ее дальнейшего развития.
Гистологическое исследование проводится путем изучения срезов опухолевого материала под микроскопом после предварительного окрашивания, которое позволяет выявить и описать отклонения от нормы в структуре ткани, дать характеристику изменениям и сделать вывод о доброкачественности или злокачественности процесса. Далее проводится иммуногистохимическое исследование (ИГХ), направленное на выявление активности роста опухоли. В ходе ИГХ в образец патологической ткани, имеющей в своем составе клетки с антигенами Ki-67, добавляют специально синтезированные меченые антитела. В процессе реакции образуется комплексы «антиген-антитело», доля которых свидетельствует о количестве клеток, находящихся в активной фазе деления. В заключении указывается индекс Ki-67 – индекс пролиферативной активности, выраженный в процентах. При низких значениях индекса опухоль считается менее агрессивной, при высоких – высокоагрессивной. Также по индексу пролиферативной активности можно судить о возможном ответе опухолевого процесса на терапию, оценить эффективность уже проведенного лечения.
Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого процесса является достаточно сложным и трудоемким анализом. Однако объективность и целесообразность его проведения оправдана точными результатами диагностики, наиболее верным выбором терапии и ответом на нее, более качественным прогнозом течения заболевания.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Результат исследования представляет собой морфологическое описание препарата и подсчет количества клеток, имеющих или не имеющих антиген Ki-67. Высчитывается индекс пролиферативной активности (процент клеток с наличием экспрессии белка Ki-67). Интерпретация полученного результата проводится врачом, назначившим исследование, в зависимости от локализации опухолевого процесса, его типа, проведенного лечения и т.д.
Кто назначает исследование?
Маркер бесконечности Ki-67
Белок Ki-67 — самый широко используемый маркер пролиферации как в нормальных, так и в опухолевых клетках. Впервые описан в 1983 году в Институте патологии в немецком городе Киль, где и были синтезированы первые антитела к нему в 67 лунке планшета [1].
Негистоновый белок Ki-67 кодируется геном MKI67. Он участвует в клеточном цикле, вовлекаясь в биогенез рибосом, организацию гетерохроматина и разделение митотических хромосом. Полный спектр его функций все еще неясен. Трудности исследования Ki-67 связаны с отсутствием гомологичных белков с уже известной функцией, а также с его большой молекулярной массой и высокой чувствительностью к разрушению протеазами [2].
Ki-67 обнаруживается в ядрах клеток во все активные фазы клеточного цикла: G1, S, G2, M. Ki-67 весьма «ветреный» белок: его распределение и количество вариабельно и зависит от конкретного момента жизни клетки (рис. 1) [3]. От фазы G1 к фазе М его количество увеличивается, достигая максимума во время метафазы митоза. В самом начале фазы G1 локализация Ki-67 совпадает с локализацией сателлитной ДНК в центромерах и теломерах хромосом. Далее при прогрессии фазы G1 эта колокализация исчезает. К середине фазы G1 белок Ki-67 начинает выявляться в ядрышках, затем, в фазу G2, — и в ядрышках, и в кариоплазме.
.
Но все меняется, когда происходит митоз. В профазу Ki-67 в виде тонкой сети связан с конденсированным хроматином. В метафазу эта сетчатая структура окружает уже отдельные хромосомы. После разрушения ядерной мембраны часть Ki-67 распределяется диффузно в цитоплазме. В анафазу и телофазу митоза количество Ki-67 в клетках начинает быстро снижаться.
При переходе клетки после митоза в фазу G0 Ki-67 быстро подвергается катаболизму (путем опосредованной протеасомами деградации) и перестает выявляться в ядрах интерфазных клеток [4].
Ki-67 также обнаруживается при гиперэкспрессии p53 и p21, вызванной блокированием репликации или повреждением ДНК [2].
Длительное время Ki-67 определялся как иммуногистохимический маркер, отражающий лишь активность пролиферации. Это обусловило его важную роль в классификации злокачественных новообразований, таких как рак молочной железы, нейроэндокринные опухоли и лимфомы [5]. Определение индекса Ki-67 является более чувствительным методом для оценки пролиферативной активности, чем подсчет фигур митоза, поскольку позволяет выявлять клетки во всех активных фазах клеточного цикла и уменьшает вероятность неверной интерпретации микроскопической картины. Переход патоморфологов в своей рутинной практике к расчету индекса пролиферации по уровню Ki-67 стал начальным этапом движения в сторону стандартизации и объективизации гистологических исследований. От двоичной системы «есть экспрессия» (1) / «нет экспрессии» (0) фокус сместился к оценке степени выраженности маркера в исследуемых образцах.
Индекс пролиферации — это процент клеток с ядерным окрашиванием от общего числа опухолевых клеток. Интенсивность и тип экспрессии маркера не учитывается (перинуклеолярный, нуклеоплазменный, перихромосомный). Подсчет включает в себя не менее 500 опухолевых клеток (в идеале не менее 1000) не менее чем в 3 полях зрения при увеличении ×400. В случае гетерогенности опухоли выбирают участки с наибольшей митотической активностью [6].
Общие характеристики уровня пролиферации для опухолевой ткани различных локализаций:
В лабораториях используют антитела к Ki-67 клонов MIB-1 (для работы с материалом, полученным от человека, крупного рогатого скота, собак, овец и лошадей) и MIB-5 (для работы с материалом, полученным от крыс и других грызунов). Эти структуры показали более высокое сродство к эпитопу антигена Ki-67 в условиях формалиновой фиксации доставляемого материала [2].
Особую значимость этот маркер приобрел при патоморфологическом исследовании опухолей молочной железы. Гистологический подтип гормон-позитивных люминальных опухолей определяется на основании индекса Ki-67: подтип А (Ki-67
.
Прогностические горизонты применения маркера Ki-67 постоянно расширяются. Уточняется и дополняется его значение в предикции результатов лекарственной терапии опухолей. Например, для рака молочной железы, который не отвечает на химиотерапию, повышение Ki-67 является плохим прогностическим маркером. Напротив, в опухолях, реагирующих на химиотерапию, этот эффект не наблюдается, и даже присутствует корреляция увеличения Ki-67 с улучшением прогноза.
Объяснение этому феномену можно логически вывести из понимания биологии каждого подтипа опухоли:
В настоящее время методы иммуногистохимической детекции Ki-67 представляются в виде несколько упрощенной картины, как будто Ki-67 «включен» во время клеточной пролиферации (характерное коричневое окрашивание ядер) и «выключен» во время покоя и старения клетки (нет окрашенных ядер, может обнаруживаться в цитоплазме). Но важное клиническое значение может иметь также интерпретация факта неуклонного роста экспрессии Ki67 от фазы G1 к фазе М. Также выяснено, что чем дольше клетка находится в состоянии покоя, тем ниже будет уровень Ki-67 при повторном входе в клеточный цикл [5,7]. Для анализа этих данных требуются методы системной биологии с выведением формулы, позволяющей учесть все характеристики Ki-67 в доставленном материале. Это позволит более точно отразить пролиферативный статус клеток и определить клиническую стратегию. Ключевым моментом эффективности таких многофакторных алгоритмов является, несомненно, точность «сырых» данных. И здесь мы уже говорим о стандартизации патоморфологического исследования, которое в современной практике должно базироваться на цифровой обработке гистологических изображений.
Уровень экспрессии ki 67 что значит
За последние десятилетия онкологическая служба шагнула далеко вперед, мы стали свидетелями беспрецедентных изменений и значительных достижений в лечении злокачественных опухолей как среди взрослого населения, так и среди детей и подростков. Это связано с ранней диагностикой, усовершенствованием оборудования для проведения инструментальных методов исследования, открытием маркеров, отражающих развитие опухолевого процесса, в связи с чем общая выживаемость детей с онкологической патологией значительно повысилась. Однако, несмотря на этот прогресс, онкологические заболевания остаются основной причиной смерти в детском и подростковом возрасте.
Группа эмбриональных опухолей занимает ведущую позицию в структуре солидных опухолей детского возраста. Особый интерес представляют эмбриональные опухоли, такие как нейробластома, нефробластома и рабдомиосаркома, ввиду частоты их встречаемости в детском и подростковом возрасте [1].
Нейробластома – наиболее часто встречающаяся экстракраниальная опухоль у детей, которая представляет собой новообразование, развивающееся из зачатков нервного гребня во время закладки симпатической нервной системы [2]. Манифестирует данное заболевание в возрасте до 5 лет, также оно может встречаться и в более раннем возрасте, с этим связана особенность данного опухолевого процесса, а именно способность опухоли в раннем детском возрасте к самостоятельному регрессу. Заболевание является гетерогенным и способно поражать любую часть тела, но наиболее частой локализацией являются забрюшинное пространство, преимущественно надпочечники, и средостение. Также стоит отметить, что данный вид опухоли подразделяется на недифференцированную, низкодифференцированную и высокодифференцированную нейробластомы. Ответ на лечение зависит не только от типа опухолевого процесса, его локализации, пола и возраста ребенка, стадии опухолевого процесса, но также и от наличия или отсутствия генетических мутаций. Одним из наиболее важных биологических маркеров данной опухоли является MYCN.Этот онкоген сверхэкспрессируется почти у 25% пациентов с верифицированной нейробластомой. В свою очередь, у пациентов с «положительным» геном MYCN отмечаются быстрое прогрессирование опухолевого процесса и неблагоприятные исходы лечения[3].
Характеристики нефробластомы во многом схожи с таковыми при нейробластоме, однако данный тип опухолевого процесса отличается своим благоприятным течением и выраженным ответом на комплексное лечение. Причина развития нейробластомы, или опухоли Вильмса, до конца неизвестна, однако считается, что одной из причин возникновения являются генетические изменения, происходящие на этапе развития мочеполовой системы. Также установлено, что нефробластома развивается из стойкой метанефрической ткани или нефрогенных остатков. Данный вид опухолевого процесса манифестирует в раннем возрасте, пик заболеваемости приходится на возраст 3–4 года, при этом опухолевое поражение почек может иметь как односторонний характер поражения, так и двусторонний, но последний встречается крайне редко. Существует ряд опухолевых маркеров, которые связаны с развитием нефробластомы: WT1, CTNNB1 и WTX [4].
Еще одним представителем среди часто встречающихся эмбриональных опухолей является рабдомиосаркома. она занимает лидирующую позицию среди сарком мягких тканей в детском возрасте. На ее долю приходится около 4,5% всех случаев злокачественных опухолей среди детей и подростков. Клетки рабдомиосаркомы во многом схожи с клетками – предшественниками скелетных мышц. В клинической практике рабдомиосаркома подразделяется на эмбриональную (приблизительно 60%), альвеолярную (приблизительно 20%), плеоморфную (приблизительно 10%) и веретеновидную/склерозирующую (приблизительно 10%). В детской онкологической практике чаще всего встречаются эмбриональная и альвеолярная рабдомиосаркомы, последняя характеризуется агрессивным течением и способностью к раннему метастазированию и рецидивированию. Однако благодаря межпрофессиональным подходам в лечении данной патологии выживаемость пациентов с рабдомиосаркомой значительно повысилась [5].
За последние десятилетия были выявлены новые биомаркеры, несущие в себе прогностическую информацию для эффективного лечения рака. Одним из таких биомаркеров является Ki-67, в настоящее время он считается одним из перспективных маркеров в изучении и прогнозировании лечения [6]. Ki-67 представляет собой белок, который экспрессируется в ядре клеток во все фазы клеточного цикла, за исключением состояния покоя (G0). Данный белок является широко используемым антигеном пролиферации опухолевых клеток путем иммуногистохимического исследования (ИГХ), в 2015 г. он был предложен в качестве меры для количественной оценки пролиферации клеток в образцах рака молочной железы [7]. Высокие уровни экспрессии Ki-67 в ткани опухоли коррелируют с более стойкой пролиферацией и неблагоприятным прогнозом [8].
Ki-67 широко применяется для оценки эффективности лечения злокачественных опухолей у взрослого населения 9.
В 2003 г. был описан способ прогноза при остеосаркомах у детей с помощью исследования уровня моноклональных антител Ki-67 [12]. Авторами исследования было установлено, что индекс связывания вышеуказанных антител в среднем составил до 9,7% при саркомах костей, что статистически достоверно превышало аналогичный показатель при доброкачественных опухолях костей. Одновременно с этим было продемонстрировано, как экспрессия данного антигена коррелировала со степенью биологической активности опухоли и с клиническим течением заболевания. Однако в отношении предложенного способа прогноза отсутствовали соответствующие исследования, связанные с возможностью его использования для оценки течения злокачественности процесса у больных детей, что не позволяет применять его с подобной целью.
Однако подобных прогностических исследований среди опухолей детского возраста, в частности эмбриональных опухолей, предложено не было.
Цели исследования – исследование и анализ уровня пролиферативной активности Ki-67 в первичной опухолевой ткани у пациентов детского и подросткового возраста с эмбриональными опухолями (такими как нефробластома, нейробластома, рабдомиосаркома), а также в опухолевой ткани после проведенного химиотерапевтического лечения, оценка его в качестве прогностического фактора.
Материалы и методы исследования
Настоящее исследование было проведено на образцах опухолевой ткани до начала специального противоопухолевого лечения и после проведения первого этапа – неоадъювантного полихимиотерапевтического лечения. Все пациенты, включенные в исследование, проходили лечение в ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России в отделении детской онкологии № 2 с января 2018 г. по декабрь 2019 г.
Отбор пациентов для участия в данном исследовании проводился методом сплошной выборки. Критерии включения: пациенты обоих полов; возраст пациентов от рождения до 18 лет; пациенты с верифицированным диагнозом «нефробластома», «нейробластома», «рабдомиосаркома»; пациенты, получившие предоперационное лечение (неоадъювантный курс ПХТ) и в последующем – оперативное лечение.
В настоящее исследования были включены 42 пациента, 16 из которых на этапе верификации процесса был выставлен диагноз «нейробластома», 20 пациентам – «нефробластома» и 6 – «рабдомиосаркома».
В возрасте до 1 года были 10 пациентов: все пациенты женского пола, у 2 пациенток – нейробластома, у 8 – нефробластома. В возрасте старше 1 года: 14 пациентов с диагнозом «нейробластома» (12 мальчика и 2 девочки), 12 пациентов с диагнозом «нефробластома» (6 девочек и 6 мальчиков), 6 – с рабдомиосаркомой (4 девочки, 2 мальчика).
Актуальное исследование было проведено на образцах опухолевой ткани, полученных на этапе верификации опухолевого процесса, а также на этапе оперативного лечения после проведения неоадъювантной полихимиотерапии, после получения согласия родителей/законных представителей. Под ингаляционно-масочной анестезией всем пациентам на этапе верификации была проведена трепанобиопсия опухолевого узла специализированными одноразовыми полуавтоматическими биопсийными иглами фирмы «GTA medical devices» под ультразвуковым контролем УЗ системы Philips IU22 (USA), Logic 400 MD (GE, USA) конвексными датчиками (3,5–5,5 МГц), стандартно в режиме двухмерного изображения [13]. Перед проведением трепанобиопсии пациенты проходили предварительную компьютерную томографическую разметку на аппарате GE LightSpeed VCT XT (64-срезовый). Полученный материал был направлен на гистологическое и иммуногистохимическое исследования. После верификации процесса все пациенты получили специальное противоопухолевое лечение согласно утвержденным протоколам. Второй этап забора опухолевой ткани, как упоминалось ранее, был произведен в операционной, после удаления остаточной опухоли. Оценка исследования была проведена на основании полученных результатов иммуногистохимического исследования (количество позитивных к маркеру пролиферативной активности Ki-67 ядер опухолевых клеток в процентном соотношении). Обработка полученных результатов проводилась в программе Statistica 10.0 с использованием непараметрического критерия Вилкоксона–Манна–Уитни.
Результаты исследования и их обсуждение
При выполнении оценки уровня пролиферативной активности Ki-67 в опухолевой ткани нейробластомы (n=20) до начала специального лечения и в зависимости от распространенности опухолевого процесса было выявлено, что при распространенности опухолевого процесса Т3 уровень Ki-67 был выше на 32,6% (63,0%±6,1%), в отличие от уровня Ki-67 при Т2 (47,5%±4,6%), также было установлено повышение уровня Ki-67 в ткани опухоли у пациентов с метастатическим поражением лимфатических узлов (на 37%) и при отдаленном метастазировании (на 23,7%) (рис. 1). Достоверно установлено, что отмечалось снижение уровня пролиферативной активности Ki-67 в опухолевой ткани в зависимости от первоначального размера опухолевого узла после проведенного специального лечения: при Т2 он составлял 15,0%±1,3% (р=0,0217), а при Т3 составил 41,6%±4,01% (р=0,0013). Меньшее влияние на значение уровня экспрессии Ki-67 после проведенного лечения оказывало наличие метастатического поражения близлежащих лимфатических узлов, что составило при N0 34,1%±3,3% (р=0,0021), при N1 55,1%±5,31% (р=0,0019). Разнонаправленное значение имело изменение Ki-67 в остаточной опухолевой ткани при наличии отдаленного метастатического поражения, где его уровень составлял 82,5%±8,11% (р=0,0011), что на 20% выше, чем до начала специального лечения, когда при отсутствии метастатического поражения отмечено снижение уровня Ki-67 на 30% (19,1%±1,8% (р=0,0017)).
Рис. 1. Уровень Ki-67 в зависимости от распространенности опухолевого процесса при нейробластоме
При оценке ответа на противоопухолевое лечение было отмечено резкое снижение уровня пролиферации опухолевых клеток при регрессии заболевания на фоне проводимой терапии в 7,5 раза относительно уровня перед началом специального лечения – 45,1%±3,8% против 6,0%±0,51% (р=0,0000) (рис. 3). И, наоборот, при прогрессировании опухолевого процесса на фоне проводимой противоопухолевой терапии отмечалось повышение уровня пролиферации более чем на 20%, что составило 83,4%±7,4% против 63,3%±6,0% до начала специальной терапии. Таким образом, согласно полученным результатам можно сделать вывод о том, что уровень пролиферативной активности Ki-67 при нейробластоме может не только служить прогностическим фактором, отражающим размеры и распространенность опухолевого процесса, но и прогнозировать исход проводимой терапии.
При оценке уровня пролиферативной активности Ki-67 в ткани опухоли, представленной нефробластомой, до начала специального лечения и в зависимости от распространенности опухолевого процесса было выявлено следующее: при распространенности опухолевого процесса Т3 уровень составил 47,5%±4,1%, что ниже, чем уровень при Т2 (83,3%±7,9% (р=0,0003)), более чем на 40%, однако по сравнению с уровнем Т1 (41,7%±3,7%) уровень Т3 не имел достоверных отличий и был ниже уровня Т2 на >30%. В зависимости от наличия или отсутствия поражения лимфатических узлов, а также при наличии или отсутствии отдаленного метастатического поражения уровни Ki-67 не имели достоверных отличий. Однако при оценке изменений уровня пролиферации после проведенного противоопухолевого лечения отмечено, что уровень Ki-67 достоверно снижался независимо от размеров опухолевого узла, наличия или отсутствия поражения близлежащих к опухоли лимфатических узлов и отдаленных метастазов (рис. 2).
Рис. 2. Уровень Ki-67 в зависимости от распространенности опухолевого процесса при нефробластоме
При регрессии заболевания (n=16) на фоне проводимой полихимиотерапии отмечено снижение уровня Ki-67, что составило 18,8%±1,7% (р=0,0318) относительно уровня перед началом специального лечения (53,0%±5,0%) (рис. 3). И наоборот, при прогрессировании опухолевого процесса (n=2) на фоне проводимой противоопухолевой терапии отмечалось резкое повышение уровня пролиферации на 40%, что составило 90,0%±8,6% (р=0,0001) против 50,1%±4,8% до начала специальной терапии. При стабилизации опухолевого процесса (n=2) уровень пролиферации не имел достоверных изменений по отношению к значениям до проведенного противоопухолевого лечения. Подводя итог, можно достоверно сказать, что исследование уровня пролиферативной активности Ki-67 в ткани нефробластомы может служить информативным показателем, отражающим размер опухолевого узла и прогноз противоопухолевой терапии, но не может являться показателем, отражающим распространенность опухолевого процесса.
При изучении опухолевой ткани, полученной от пациентов с рабдомиосаркомой, нам, к сожалению, не удалось оценить влияния уровня Ki-67 на распространенность опухолевого процесса, так как все пациенты данной группы (n=6) имели одинаковую распространенность, но стоит отметить, что уровень пролиферативной активности у данной группы пациентов был высок и составил при Т2N0M0 65,1%±5,3%.
Но, несмотря на вышеописанное, нам удалось оценить изменение пролиферативной активности ткани Ki-67 после проведенного полихимиотерапевтического лечения. При исследовании ответа было выявлено, что при регрессе опухолевого процесса (n=5) уровень Ki-67 снизился практически на 50% и составил 23,3%±2,1% (р=0,0384), до лечения уровень составлял 70,0%±6,8%. При прогрессировании опухолевого процесса было отмечено повышение уровня пролиферации >30%, что достоверно составило 85,2%±8,31% (р=0,0004) относительно 50,1%±4,7% на этапе верификации до проведения специального лечения. Можно сделать вывод, что изменение уровня пролиферативной активности Ki-67 как прогностического фактора возможно только для оценки исхода проводимого лечения.
На рисунке 3 схематически отображено изменение уровня Ki-67 в зависимости от ответа на проведенную терапию, а также в зависимости от морфологической природы опухоли.
Рис. 3. Оценка уровня Ki-67 в зависимости от проведенного лечения при различных типах эмбриональных опухолей
Заключение
В результате проведенного ИГХ-исследования нами было установлено, что изменение уровня экспрессии Ki-67 при нейробластоме в ткани первичной опухоли соответствовало размерам опухолевого узла, а также стадии опухолевого процесса, при нефробластоме же он отражал лишь размер опухолевого узла. Достоверных данных об изменении размеров опухолевого узла и распространенности опухолевого процесса при рабдомиосаркоме получено не было. Однако при всех типах опухолевого процесса отмечалось достоверное изменение уровня пролиферативной активности Ki-67 в зависимости от ответа на противоопухолевое химиотерапевтическое лечение.
Таким образом, нами была подтверждена возможность применения в рутинном ИГХ-исследовании Ki-67 в качестве непосредственного маркера, характеризующего отдаленный прогноз опухолевого процесса.