определение белковых фракций можно проводить в

Белковые фракции

Синонимы: Белковые фракции, Протеинограмма, Serum Protein Electrophoresis, SPE, SPEP

Научный редактор: М. Меркушева, ПСПбГМУ им. акад. Павлова, лечебное дело.
Октябрь, 2018.

Общие сведения

Одним из основных компонентов крови является белок, который состоит из фракций (альбумина и нескольких видов глобулинов), образующих определенную формулу количественного и структурного соотношения. При воспалительных (острых и хронических) процессах, а также при онкологических патологиях формула белковых фракций нарушается, что позволяет оценить физиологическое состояние организма и диагностировать ряд серьезных заболеваний.

Под действием электрического поля (на практике применяется электрофорез) белок разделяется на 5-6 фракций, которые отличаются по местоположению, подвижности, структуре и доле в общей белковой массе.

Другие фракции представляют собой глобулины:

Альфа-1

К ним относятся белки острой фазы (быстрого реагирования):

Альфа-2

Также включают белки острой фазы:

Бета

К этой группе относят белки:

Гамма

Фракция включает важнейшие белки иммуноглобулины разных классов (IgА, IgМ, IgЕ, IgG), которые являются антителами и отвечают за местный и общий иммунитет организма.

В результате развития острых или обострения хронических воспалительных заболеваний соотношение белковых фракций изменяется. Уменьшение количества того или иного вида белка может наблюдаться при иммунодефицитах, которые свидетельствуют о серьезных процессах в организме (аутоиммунные заболевания, ВИЧ, онкология и т.д.). Избыток зачастую свидетельствует о моноклональной гаммапатии (производство аномальных типов иммуноглобулинов). К последствиям гаммапатии можно отнести множественную миелому (рак плазматических клеток), макроглобулинемию Вальденстрема (опухоль костного мозга) и т.д. Также может возникнуть поликлональная гаммапатия (секреция аномального количества иммуноглобулинов). Результатом являются инфекционные болезни, аутоиммунные патологии, заболевания печени (например, вирусные гепатиты) и другие хронические процессы.

Показания к анализу

Исследование белковых фракций позволяет диагностировать синдром иммунодефицита, онкологические и аутоиммунные процессы.

Также врач может назначить протеинограмму в следующих случаях:

Исследование белковых фракций в крови (протеинограмма) выявляют концентрацию общего белка, количественное соотношение альбуминов и глобулинов.

Нормы для общего белка

Нормы для белковых фракций

Референсный диапазон, используемый в лаборатории Инвитро 1 :

Нормы для белковых фракций в лаборатории Хеликс 1 :

Справочник Л.А.Даниловой, 2014 2 :

Отклонения от нормы

Факторы влияния на результат

Расшифровку результата анализа на белковые фракции может проводить врач-гематолог, а также онколог, терапевт, хирург и т.д.

Подготовка

Биоматериал для исследования – сыворотка венозной крови.

Метод забора – венепункция локтевой вены.

Время забора крови – утренние часы (до 11.00).

Обязательное требование – процедура проводится строго натощак!

Дополнительные требования к подготовке

За 3 дня до теста нельзя менять меню и режим питания (запрещены диеты, голодания, посты, переход на вегетарианство и т.д.);

Накануне венепункции исключить из рациона жирные, копченые и острые продукты, жареные блюда, алкоголь и энергетики;

В день анализа можно пить только воду без газа;

За 1-3 часа до забора крови не рекомендуется курить.

Важно! Лечащему врачу необходимо заранее сообщить о текущем или недавно законченном приеме каких-либо лекарственных препаратов, витаминов, биологически активных добавок (с указанием их названия, дозировок, продолжительности лечения).

Важно! Все материалы носят справочный характер и ни в коей мере не являются альтернативой очной консультации специалиста.

Этот сайт использует cookie-файлы для идентификации посетителей сайта: Google analytics, Yandex metrika, Google Adsense. Если для вас это неприемлемо, пожалуйста, откройте эту страницу в анонимном режиме.

Источник

Белковые фракции в т.ч. Общий белок (венозная кровь) в Москве

Белок — один из самых важных биохимических компонентов человеческого организма, который выполняет множество функций. Данное исследование — протеинограмма — определяет показатель количества общего (суммарного) белка и его основных фракций в крови с целью диагностики и контроля лечения различных заболеваний.

Приём и исследование биоматериала

Когда нужно сдавать анализ Белковые фракции в т.ч. Общий белок?

Подробное описание исследования

Общий белок (протеин) — это собирательный термин, включающий в себя разные виды, или фракции, белков сыворотки крови. Фракции выявляют при помощи специального метода — электрофореза, в основе которого лежит определение разной подвижности протеинов в электрическом поле. Выделяют следующие виды белков плазмы: альбумины и глобулины. В норме их соотношение в сыворотке неодинаково, и они постоянно находятся в состоянии динамического равновесия с белками различных органов и тканей.

Альбумины составляют порядка 60 % от суммарного количества протеинов сыворотки. Они выполняют множество биохимических функций: транспорт биологически активных веществ, поддержание онкотического (осмотического) давления крови и др.

Глобулины, в свою очередь, подразделяются на:

Основной представитель группы α1-глобулинов белок острой фазы — α1-антитрипсин. Также в эту группу входят α1-липопротеид и кислый α1-гликолипопротеид. Концентрация альфа-1-антитрипсина повышается при острых и хронических воспалительных процессах, а также онкологических заболеваниях.

К α2-глобулинам относятся α2-макроглобулин, гаптоглобин и аполипопротеин B. Изменение показателя α2-макроглобулина (основного фракционного белка) наблюдается при развитии нефротического синдрома, сахарного диабета, панкреатита и воспалительных заболеваний.

В подтип β-глобулинов входят некоторые иммуноглобулины (антитела), трансферрин и церулоплазмин. Иммуноглобулины класса G, A, D, M и E относятся к γ–глобулинам — представителям гуморальной (неклеточной) иммунной системы.

Анализ протеинограммы полезен не только при инфекционных и аутоиммунных заболеваниях, но также и в диагностике моноклональных гаммапатий — множественной миеломы, макроглобулинемии Вальденстрема и др. Эти патологии сопровождаются злокачественным перерождением B-лимфоцитов, которые начинают бесконтрольно образовывать иммуноглобулины одного типа (класса). Результат электрофореза позволяет оценить только наличие аномальных γ-глобулинов (иммуноглобулинов), но не определить их подтип. Для этого следует сдать дополнительный тест с последующим определением типа аномальных глобулинов — иммунофиксацию или типирование парапротеина в сыворотке крови.

Следует помнить, что во многих клинических ситуациях результат протеинограммы не является ключевым условием для подтверждения или исключения предполагаемого диагноза. В связи с этим, показатели данного исследования должны оцениваться врачом только в комплексе с симптомами, объективными клиническими и лабораторно-инструментальными данными.

Источник

Белковые фракции в сыворотке

Определение количественных и качественных изменений основных фракций белка крови, используемое для диагностики и контроля лечения острых и хронических воспалений инфекционного и неинфекционного генеза, а также онкологических (моноклональных гаммапатий) и некоторых других заболеваний.

Синонимы английские

Serum Protein Electrophoresis (SPE, SPEP).

Электрофорез на пластинках с агарозным гелем.

Г/л (грамм на литр), % (процент).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

Общий белок сыворотки крови включает в себя альбумин и глобулины, которые в норме находятся в определенном качественном и количественном соотношении. Оно может быть оценено с помощью нескольких лабораторных методов. Электрофорез белков в агарозном геле – это метод разделения белковых молекул, основанный на различной скорости их движения в электрическом поле в зависимости от размера, заряда и формы. При разделении общего белка сыворотки крови удается выявить 5 основных фракций. При проведении электрофореза белковые фракции определяются в виде полос различной ширины с характерным, специфичным для каждого типа белка местоположением в геле. Для определения доли каждой фракции в общем количестве белка оценивают интенсивность полос. Так, например, основная белковая фракция сыворотки – это альбумин. На его долю приходится около 2/3 всего белка крови. Альбумин соответствует самой интенсивной полосе, полученной при электрофорезе белков сыворотки крови здорового человека. К другим фракциям сыворотки, выявляемым с помощью метода электрофореза, относят: альфа-1 (преимущественно альфа-1-антитрипсин), альфа-2 (альфа-2-макроглобулин и гаптоглобин), бета (трансферрин и С3-компонент комплемента) и гамма-глобулины (иммуноглобулины). Различные острые и хронические воспалительные процессы и опухолевые заболевания сопровождаются изменением нормального соотношения белковых фракций. Отсутствие какой-либо полосы может указывать на дефицит белка, что наблюдается при иммунодефицитах или недостаточности альфа-1-антитрипсина. Избыток какого-либо белка сопровождается увеличением интенсивности соответствующей полосы, что наиболее часто наблюдается при различных гаммапатиях. Результат электрофоретического разделения белков может быть представлен графически, при этом каждая фракция характеризуется определенной высотой, отражающей ее долю в общем белке сыворотки. Патологическое увеличение доли какой-либо фракции носит название «пик», например «М-пик» при множественной миеломе.

Исследование белковых фракций играет особую роль при диагностике моноклональных гаммапатий. В эту группу заболеваний входят множественная миелома, моноклональная гаммапатия неясного генеза, макроглобулинемия Вальденстрема и некоторые другие состояния. Эти заболевания характеризуются клональной пролиферацией В-лимфоцитов или плазматических клеток, при которой происходит бесконтрольная выработка одного вида (одного идиотипа) иммуноглобулинов. При разделении сывороточного белка пациентов с моноклональной гаммапатией с помощью электрофореза наблюдаются характерные изменения – появление узкой интенсивной полосы в зоне гамма-глобулинов, которая называется М-пик, или М-белок. М-пик может отражать гиперпродукцию любого иммуноглобулина (как IgG при множественной миеломе, так и IgM при макроглобулинемии Вальденстрема и IgA при моноклональной гаммапатии неясного генеза). Важно отметить, что метод электрофореза в агарозном геле не позволяет дифференцировать различные классы иммуноглобулинов между собой. Для этой цели используют иммуноэлектрофорез. Кроме того, данное исследование позволяет дать приблизительную оценку количества патологического иммуноглобулина. В связи с этим исследование не показано для дифференциальной диагностики множественной миеломы и моноклональной гаммапатии неясного генеза, так как она требует более точного измерения количества М-белка. С другой стороны, если диагноз «множественная миелома» был верифицирован, метод электрофореза в агарозном геле может быть использован для оценки динамики М-белка при контроле лечения. Следует отметить, что у 10 % пациентов с множественной миеломой нет никаких отклонений в протеинограмме. Таким образом, нормальная протеинограмма, полученная с помощью электрофореза в агарозном геле, не позволяет полностью исключить это заболевание.

Другим примером гаммапатии, выявляемой с помощью электрофореза, является ее поликлональная разновидность. Она характеризуется гиперпродукцией различных видов (различных идиотипов) иммуноглобулинов, что определяется как однородное увеличение интенсивности полосы гамма-глобулинов при отсутствии каких-либо пиков. Поликлональная гаммапатия наблюдается при многих хронических воспалительных заболеваниях (инфекционных и аутоиммунных), а также при патологии печени (вирусных гепатитах).

Исследование белковых фракций сыворотки крови используют для диагностики различных синдромов иммунодефицита. Примером может послужить агаммаглобулинемия Брутона, при которой снижается концентрация всех классов иммуноглобулинов. Электрофорез белков сыворотки пациента с болезнью Брутона характеризуется отсутствием или крайне низкой интенсивностью полосы гамма-глобулинов. Низкая интенсивность альфа-1-полосы – характерный диагностический признак недостаточности альфа-1-антитрипсина.

Широкий спектр состояний, при которых наблюдаются качественные и количественные изменения протеинограммы, включает самые разные заболевания (от хронической сердечной недостаточности до вирусных гепатитов). Несмотря на наличие некоторых типичных отклонений протеинограммы, позволяющих в ряде случаев с определенной уверенностью диагностировать заболевание, обычно результат электрофореза белков сыворотки не может служить однозначным критерием постановки диагноза. Поэтому интерпретацию исследования белковых фракций крови проводят с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

Источник

Определение белковых фракций можно проводить в

В настоящее время наиболее распространено определение белковых фракций сыворотки крови методом электрофореза на бумаге (Р. С. Колесникова, 1959; П. А. Веселова, 1961; В. К. Гостищев, 1965; К. А. Цыбырнэ, 1965, и др.).

Этим способом разделяются 5 фракций белка: альбумины, альфа-1, альфа-2, бета- и гамма-глобулины. Для обнаружения белковых фракций используют свойство белков связывать некоторые красители. Содержание белковой фракции определяют по количеству связанного с ней красителя.

1. Раствор для отмывания электрофоре грамм от несвязавшейся с белком краски: 2% раствор уксусной к-ислоты для бромфенолового синего.
2. Для элюирования бромфенолового синего применяют 0,01 едкий натр.
3. Бумага. Хроматографическая быстро впитывающая бумага марки «Б» или медленно впитывающая марки «М» Ленинградской бумажной фабрики им. Володарского. Следует все время работать с одним выбранным сортом бумаги. Для электрофореза на бумаге необходимы камера и источник постоянного тока, а для количественной расшифровки — ФЭК-Ж.

Камера ПЭФ состоит из ванны, в которой помещены две кюветы, разделенные перегородкой. В наружной части кюветы погружено по два угольных электрода. Электрическая связь между внутренними кюветами осуществляется при помощи полос хроматографической бумаги, подвешенных на перегородке кювет. Кюветы заливают доверху буферным раствором. Регулировочными винтами устанавливают камеру в горизонтальное положение по уровню. Хроматографическую бумагу нарезают полосами шириной 3 см и длиной 26 см. Бумагу следует аккуратно нарезать лезвием, без складок и изъянов, лучше вдоль листа.

Отмечают черным карандашом середину полосы и место нанесения сыворотки — 3 см от катода. После этого ленты помещают в камеру, причем концы их должны быть опущены во внутреннее отделение кювет. Камеру закрывают двускатной крышкой, подключают к источнику питания на 1/2 часа. После этого выключают ток, снимают крышку и при помощи пипетки наносят на отмеченное на полосе место ровным слоем сыворотку в количестве 0,015 мл, затем закрывают камеру и включают ток. Электрофорез проводят при комнатной температуре, при напряжении 175—200 в в продолжение 5 часов. По окончании электрофореза ток выключают.

Сушат электрофорез в сушильном шкафу в горизонтальном положении в течение 15 минут при 105°, после этого ленты окрашивают в эмалированных кюветах, погружая их на 20—30 минут в раствор бромфенола синего. Затем раствор сливают, а не связавшийся с белками краситель удаляют, промывая отдельными порциями 2% уксусной кислоты до тех пор, пока последняя порция уксусной кислоты не останется бесцветной. Ленты сушат при комнатной температуре. Для элюирования участки ленты, содержащие каждую фракцию, вырезают и помещают в пробирку, а альбумины — в стаканчик. Встряхивают и оставляют на 1/2 часа, а затем колориметрируют в ФЭК с зеленым светофильтром в 5-миллиметровой кювете. Если нужно получить более интенсивную окраску фракции, то высушенные ленты проводят над открытой бутылкой с аммиаком.

После колориметрирования складывают экстинкции всей фракции (экстинкцию альбуминов утраивают). Для получения хороших электрофореграмм необходимо соблюдать все правила, указанные в методике, и внимательно следить за буфером, рН которого должно быть постоянно. Угольные электроды очень загрязняют буфер, поэтому его необходимо часто менять.

Источник

Белковые фракции

ГЛОБУЛИНЫ
В отличие от альбуминов глобулины не растворимы в воде, а растворимы в слабых солевых растворах.

a1-ГЛОБУЛИНЫ
В эту фракцию входят разнообразные белки. a1-глобулины имеют высокую гидрофильность и низкую молекулярную массу. Поэтому при патологии почек легко теряются с мочой. Однако их потеря не оказывает существенного влияния на онкотическое давление крови, потому что их содержание в плазме крови невелико.

a2-ГЛОБУЛИНЫ.
Высокомолекулярные белки. Эта фракция содержит регуляторные белки, факторы свертывания крови, компоненты системы компемента, транспортные белки. Сюда относится и церулоплазмин. Этот белок имеет 8 участков связывания меди. Он является переносчиком меди, а также обеспечивает постоянство содержания меди в различных тканях, особенно в печени. Гаптоглобины. Содержание этих белков составляет приблизительно 1/4 часть от всех a2-глобулинов. Гаптоглобин образует специфические комплексы с гемоглобином, освобождающимся из эритроцитов при внутрисосудистом гемолизе. Вследствие высокой молекулярной массы этих комплексов они не могут выводиться почками. Это предотвращает потерю железа организмом.

Комплексы гемоглобина с гаптоглобином разрушаются клетками ретикуло-эндотелиальной системы (клетки системы мононуклеарных фагоцитов), после чего глобин расщепляется до аминокислот, гем разрушается до билирубина и экскретируется желчью, а железо остается в организме, и может быть реутилизировано. К этой же фракции относится и a2-макроглобулин. Молекулярная масса этого белка 720 кДа, концентрация в плазме крови 1.5–3 г/л. Он является эндогенным ингибитором протеиназ всех классов, а также связывает гормон инсулин. Время полужизни a2-макроглобулина очень малое — 5 минут. Это универсальный «чистильщик» крови, комплексы «a2-макроглобулин-фермент» способны сорбировать на себе иммунные пептиды, например, интерлейкины, факторы роста, фактор некроза опухолей, и выводить их из кровотока.

С1-ингибитор — гликопротеид, является основным регуляторным звеном в классическом пути активации комплемента (КПК), способен угнетать плазмин, калликреин. При недостатке С1-ингибитора развивается ангионевротический отек.

b-ГЛОБУЛИНЫ
К этой фракции относятся некоторые белки системы свертывания крови и подавляющее большинство компонентов системы активации комплемента (от С2 до С7).

Основу фракции b-глобулинов составляют Липопротеины Низкой Плотности (ЛПНП), трансферин (белок-переносчик железа), гемопексин (связывает гем, что предотвращает его выведение почками и потерю), компоненты комплемента (участвующие в реакциях иммунитета), и часть иммуноглобулинов.

g-ГЛОБУЛИНЫ
В этой фракции содержатся в основном АНТИТЕЛА. Функция антител — защита организма от чужеродных агентов (бактерии, вирусы, чужеродные белки), которые называются АНТИГЕНАМИ.

Иммуноглобулины, (в порядке количественного убывания — IgG, IgA, IgM, IgE), функционально представляющих собой антитела, обеспечивающие гуморальную иммунную защиту организма от инфекций и чужеродных веществ.

Только IgG и IgM способны активировать систему комплемента. С-реактивный белок также способен связывать и активировать С1-компонент комплемента, но эта активация непродуктивна и приводит к накоплению анафилотоксинов. Накопившиеся анафилотоксины вызывают аллергические реакции.

К группе гамма-глобулинов относится также криоглобулины. Это белки, которые способны выпадать в осадок при охлаждении сыворотки. У здоровых людей их в сыворотке нет. Они появляются у больных с ревматическим артритом, миеломной болезнью.

Фракция альфа1- глобулина: Беременность (3 триместр); Патология паренхимы печени; Острые и хронические воспалительные процессы (инфекции и ревматические заболевания); Опухоли; Травма и хирургические вмешательства; Прием андрогенов.

Фракция альфа 2-глобулина: Беременность; Нефротический синдром, Гепатит, Цирроз печени, Прием эстрогенов и оральных контрацептивов, Злокачественные опухоли, Некроз тканей, Хронический воспалительный процесс.

Фракция бета-глобулина: Беременность; Первичные и вторичные гиперлипопротеинемии; Моноклональные гаммапатии; Прием эстрогенов, Железодефицитная анемия (повышение трансферрина); Механическая желтуха.

Понижение уровня: Альбумин: Нарушения питания; Синдром мальабсорбции; Болезни печени и почек; Опухоли; Коллагенозы; Ожоги; Гипергидратация; Кровотечения; Анальбуминемия; Беременность.

Фракция альфа1-глобулина: Наследственный дефицит альфа1-антитрипсина; Болезнь Tangier.

Фракция альфа2-глобулина: панкреатит, ожоги, травмы; Снижение гаптоглобина (гемолиз различной этиологии, панкреатит, саркоидоз); Фракция бета-глобулина: Гипо-b-липопротеинемии; Дефицит IgA; Фракция гамма-глобулина: Иммунодефицитные состояния; Прием глюкокортикоидов; Беременность.

Источник