Фемофлор абсолютный нормоценоз что значит
Фемофлор
Фемофлор — это скрининговое исследование микрофлоры урогенитального тракта у женщин методом ПЦР (в режиме Real-time реального времени).
Фемофлор назначают при:
Вагинальная микрофлора
Причины и факторы нарушения вагинального биоценоза
Показания и противопоказания к применению метода
Способ позволяет в короткие сроки объективно:
С помощью данного метода определяются следующие показатели:
Варианты комплектации «ФЕМОФЛОР»
Группа | Выявляемые показатели | ФЕМОФЛОР СКРИН | ФЕМОФЛОР 16 |
Диагностика нормоценоза | Общая бактериальная масса | ● | ● |
Lactobacillus spp. / ВК | ● | ● | |
Аэробные микроорганизмы | Сем. Enterobacteriaceae | ● | |
Streptococcus spp. | ● | ||
Staphylococcus spp. | ● | ||
Анаэробные микроорганизмы | Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp. | ● | ● |
Eubacterium spp. | ● | ||
Sneathia spp. + Leptotrihia spp.+ Fusobacterium spp. | ● | ||
Megasphaera spp.+ Veilonella spp. + Dialister spp. | ● | ||
Lachnobacterium spp. + Clostridium spp. | ● | ||
Mobiluncus spp. + Corynebacterium spp. | ● | ||
Peptostreptococcus spp. | ● | ||
Atopobium vaginae | ● | ||
Группа Микоплазм | Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium | ● | ● |
Ureaplasma (urealyticum + parvum) | ● | ● | |
Грибы | Candida spp./контроль взятия материала (КВМ) | ● | ● |
Патогены | Trichomonas vaginalis / Neisseria gonorrhoeae / Chlamydia trachomatis / ВК | ● | |
Herpes symplex virus 2/ Cytomegalovirus/ Herpes symplex virus 1/ ВК | ● |
Правила подготовки к исследованию «ФЕМОФЛОР»
Забор урогенитального материала у детей до 18 лет, беременных, девственниц осуществляет врач гинеколог (приносной материал).
Фемофлор абсолютный нормоценоз что значит
Фемофлор 16 – расширенное молекулярно-биологическое исследование качественного и количественного состава микрофлоры мочеполовых путей у женщин, включающее оценку общей бактериальной массы, состояния нормофлоры, определение широкого спектра клинически значимых условно-патогенных микроорганизмов, в том числе микоплазм и уреаплазм, а также грибов рода Candida.
Исследование информативно только для женщин репродуктивного возраста.
Исследование биоценоза влагалища методом ПЦР.
Femoflor 16 Real Time PCR.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
По данным проекта Human Microbiom Project Национального института здоровья США, установлено, что в организме человека обитает около 10 000 видов микроорганизмов, преимущественными локусами распространения которых являются кожа, кишечник и урогенитальный тракт. Микрофлора мочеполовых путей у женщин в норме представлена преимущественно различными видами бактерий рода Lactobacillus, которые играют большую роль в предотвращении колонизации урогенитального тракта болезнетворными микроорганизмами. Вследствие различных причин может возникать дисбаланс микробиоты мочеполового тракта, выражающийся в нарушении её количественных и качественных характеристик, что в итоге приводит к развитию воспалительного процесса. Рядом исследований показано, что в этиологической структуре мочеполовых инфекций, обусловленных дисбалансом условно-патогенной флоры, в большинстве случаев играет роль ассоциация микроорганизмов и изменения в составе нормофлоры. Клинически такие состояния очень часто характеризуются нечеткой выраженностью симптомов, отсутствием специфических признаков и склонностью к хроническому течению, что обуславливает высокий риск присоединения инфекций, вызванных патогенными микроорганизмами, а также развития осложнений со стороны репродуктивной системы. Это определяет первостепенную роль своевременной и качественной диагностики урогенитальных инфекций, ассоциированных с условно-патогенной микрофлорой. Традиционные лабораторные исследования, проводимые для обнаружения болезнетворных микроорганизмов, которые позволяют определить факт наличия возбудителя, малоинформативны в диагностике заболеваний, вызванных условно-патогенной флорой, так как обнаружение её представителей само по себе не свидетельствует о заболевании. Также необходимо отметить, что условно-патогенная микрофлора, наиболее часто являющаяся причиной воспалительных заболеваний мочеполовых путей у женщин, представлена преимущественно анаэробными микроорганизмами (живущими в условиях отсутствия кислорода). Культивирование таких бактерий является технически очень сложным процессом, требующим специального оборудования, и в настоящее время в большинстве лечебных учреждений затруднено.
Проблему качественной диагностики урогенитальных инфекций, вызванных условно-патогенной флорой, позволило решить внедрение в практику метода полимеразной цепной реакции с детекцией результатов в режиме реального времени. Методика исследования основана на обнаружении в исследуемом материале генетического материала (ДНК) микроорганизма, его многочисленном копировании и идентификации. Так как количество полученных в конце реакции копий зависит от исходного количества исследуемой ДНК, анализ позволяет определить содержание микроорганизма в биоматериале. Отечественная разработка Фемофлор, основанная на технологии RT-ПЦР, предназначена для исследования биоценоза урогенитального тракта у женщин и позволяет выявлять ДНК условно-патогенных микроорганизмов, ДНК лактобактерий и геномной ДНК человека (в качестве контрольного параметра). Спектр выявляемых показателей позволяет получить комплексное представление о качественных и количественных изменениях состава микрофлоры урогенитального тракта, что во многом определяет адекватную тактику медикаментозной терапии. Разработано несколько вариантов комплектации тестовых систем Фемофлор, в зависимости от спектра выявляемых условно-патогенных микроорганизмов. Фемофлор 16 позволяет определять 25 показателей, включая контроль взятия материала, общую бактериальную массу и 23 группы микроорганизмов:
Lactobacillus spp. – в большинстве случаев составляют основу нормальной микрофлоры влагалища у женщин репродуктивного возраста;
Семейство Enterobacteriaceae, Streptococcus spp., Staphylococcus spp. – являются компонентами нормальной флоры урогенитального тракта у женщин, могут быть причиной вагинита;
Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp. – представители нормальной и транзиторной (Gardnerella vaginalis) флоры, этиологические агенты развития бактериального вагиноза;
Eubacterium spp. – бактерии этого семейства преимущественно обитают в кишечнике, условно патогенны, могут вызывать развитие бактериального вагиноза;
Sneathia spp., Leptotrihia spp., Fusobacterium spp. – анаэробные микроорганизмы, с ними может быть ассоциировано развитие бактериального вагиноза;
Veilonella spp., Megasphaera spp., Dialister spp. – условно-патогенные анаэробные бактерии, участвуют в развитии бактериального вагиноза;
Lachnobacterium spp. – анаэробные труднокультивируемые бактерии, ассоциированы с развитием бактериального вагиноза;
Clostridium spp. – представитель нормальной флоры кишечника, в урогенитальном тракте условно-патогенный микроорганизм, может вызывать бактериальный вагиноз;
Mobiluncus spp., Corynebacterium spp. – анаэробные условно-патогенные микроорганизмы, могут вызывать инфекции урогенитального тракта;
Peptostreptococcus spp. – анаэробные кокки (шаровидные бактерии), условно-патогенны, могут вызывать бактериальный вагиноз;
Atopobium vaginae – анаэробный микроорганизм, может приводить к бактериальному вагинозу;
Mycoplasma hominis, Ureaplasma (urealyticum + parvum) – условные патогены;
Mycoplasma genitalium – патогенный микроорганизм, вызывает уретрит (воспаление мочеиспускательного канала).
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
При наличии клинических или лабораторных признаков воспалительного процесса урогенитального тракта.
При планирующихся оперативных вмешательствах на органах малого таза с высоким риском развития инфекционных осложнений.
Диагностический поиск при наличии отягощенного акушерского анамнеза (невынашивание беременности, перинатальные потери, бесплодие).
Плановое обследование перед планированием беременности, при подготовке к процедуре экстракорпорального оплодотворения.
Мониторинг эффективности проводимой терапии, восстановления нормоценоза.
Что означают результаты?
КВМ – контроль взятия материала. Необходимым условием качественного ПЦР-исследования считается правильное взятие биоматериала. Показателем адекватности полученного образца является достаточное количество ДНК человека, которая в процессе реакции выделяется из клеток, выстилающих слизистую оболочку и попадающих в пробу при правильном взятии мазка. Показатель КВМ менее 10 4 свидетельствует о недостоверных результатах ПЦР, в таких случаях рекомендуется повторное взятие биоматериала.
ОБМ (общая бактериальная масса) – общее количество бактерий, имеющихся в исследуемом образце. Снижение ОБМ ниже пороговых значений свидетельствует о недостаточном заселении данного локуса бактериями, в том числе вследствие антибиотикотерапии или гормональных нарушений.
Оценка условно-патогенной флоры. Количество аэробных и анаэробных бактерий также оценивается в абсолютных и относительных показателях. Относительный показатель высчитывается по разнице между десятичными логарифмами микроорганизма или их группы и ОБМ. По уровню относительной величины определяется незначительное, умеренное и значительное повышение.
Оценка микоплазм, уреаплазм и грибов рода Candida проводится только по абсолютному показателю, при превышении определенного порога (10 3 для Candida, 10 4 для микоуреаплазм) аппарат фиксирует положительный результат.
Для более удобной интерпретации результатов исследования используется специальная цветовая маркировка:
контрольные показатели: белый – соответствие критериям, красный – несоответствие;
условно-патогенные микроорганизмы и дрожжеподобные грибы: белый – соответствие критериям нормы, желтый – умеренное отклонение, красный – выраженное отклонение от нормы;
нормальная флора (лактобациллы): зеленый – нормоценоз (соответствие критериям нормы), желтый – умеренный дисбиоз (умеренное отклонение от нормы), красный – выраженный дисбиоз;
патогенные микроорганизмы: белый – не обнаружены, красный – обнаружены.
По результатам исследования автоматически дается характеристика состояния микрофлоры: нормоценоз, умеренный или выраженный дисбаланс, который по этиологической структуре может быть анаэробным, аэробным и смешанным.
Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов женщин (микрофлора), 3 локализации
Исследование микробиоценоза влагалища с определением чувствительности к антибиотикам
Chlamydia trachomatis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Neisseria gonorrhoeae, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Trichomonas vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
Кто назначает исследование?
Гинеколог, репродуктолог, врач общей практики.
Исследование биоценоза урогенитального тракта Фемофлор-16 (определение ДНК) (16 показателей + КВМ)
Что такое Фемофлор?
Дисбаланс микробиоты урогенитального тракта женщин, обусловленный условно-патогенными микроорганизмами, характеризуется изменением качественного и/или количественного состава нормобиоты, метаболическими и иммунными нарушениями, в ряде случаев клиническими проявлениями. Частным проявлением выраженного дисбаланса биоты является бактериальный вагиноз.
Полное выявление этиологической структуры заболевания позволит своевременно установить диагноз, выявить осложненные формы течения заболевания и, соответственно, провести направленную адекватную терапию, в том числе на ранней стадии, до развития осложнений.
В основу метода положена комплексная количественная оценка биоты методом ПЦР в «реальном времени» (РВ). Проводят сравнение количества конкретных представителей нормо – и условно-патогенной биоты с общим количеством микроорганизмов с целью выявления дисбаланса биоты, степени его выраженности и определения этиологической роли конкретных микроорганизмов в его развитии при условии контроля качества получения клинического образца для исследования.
Способ позволяет в короткие сроки объективно оценить:
Показатели, анализируемые с помощью набора Фемофлор 16:
Контроль взятия материала (КВМ).
Необходимым условием количественного анализа урогенитальной биоты является правильная техника взятия соскоба с поверхности соответствующего биотопа (уретра, цервикальный канал, влагалище). Показателем правильного взятия биоматериала является достаточное количество геномной ДНК человека в пробе. Источником этой ДНК являются эпителиальные клетки, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала. Оптимальная величина этого показателя должна составлять не менее 105.
Показатель оценивается в абсолютных значениях.
Общая бактериальная масса (ОБМ).
Показатель, по которому можно судить об общем количестве бактерий. Оценивается в абсолютных значениях. Обычно эта величина составляет 106 – 108. Величина ОБМ большая, чем 108, свидетельствует об избыточном микробном обсеменении биоматериала. Чем больше величина ОБМ, тем больше величина микробной массы в образце. Величина показателя ОБМ меньшая, чем 105 соответствует сниженному количеству микроорганизмов в образце, что может быть следствием атрофических процессов или антибиотикотерапии.
Оценка нормобиоты.
Главным представителем нормофлоры урогенитального тракта у женщин репродуктивного возраста являются представители рода Lactobacillus (ЛБ).
Оценка нормобиоты производится как в абсолютных значениях, так и относительно общей бактериальной массы. В норме абсолютное количество лактобацилл практически не отличается от общего количества бактерий, то есть составляет 106–108
Относительное количество лактобацилл – разница между Lg10 общей бактериальной массы (ОБМ) и Lg10 лактобацилл (ЛБ). Например, если общее количество бактерий составляет 107, Lg10 этого количества будет равен 7. В норме разница логарифмов (порядков) ОБМ и ЛБ не должна превышать 0,5, что определяется погрешностью метода.
Умеренно сниженный уровень лактобацилл – при разнице логарифмов (порядков) от 0,5 до 1.
Значительно сниженный уровень лактобацилл–при разнице логарифмов (порядков) больше чем 1.
Чем меньшую долю в ОБМ составляют лактобациллы, тем сильнее угнетена нормальная флора.
Оценка аэробной и анаэробной условно-патогенной микрофлоры.
Количественный уровень аэробной и анаэробной условно-патогенной микрофлоры можно оценить как в абсолютных, так и относительных значениях. Абсолютные количества соответствуют показателям при бактериологичесих исследованиях. Например, количество микроорганизма Gardnerella vaginalis составляет 103.
Относительное количество того или иного микроорганизма вычисляется по отношению к количеству Lactobacillus spp., по разнице между Lg10 лактобацилл и Lg10 конкретного микроорганизма аналогично тому, как вычисляется относительное количество самих лактобацилл по отношению к общему количеству бактерий (ОБМ).
В урогенитальном тракте женщин репродуктивного возраста как аэробные, так и анаэробные условно-патогенные микроорганизмы могут быть причиной патологических процессов в урогенитальном тракте.
Оценка микоплазм, уреаплазм и грибов рода Candida.
Показания к назначению анализа
Материал для исследования
Для исследования используют соскобы эпителиальных клеток
Критерии количественной оценки биоты
Абсолютный показатель является ориентировочным, зависит от техники взятия биоматериала и способа выделения ДНК.
Нормоценоз
Состояние нормоценоза характеризуется следующими показателями:
Умеренный дисбиоз
Выраженный дисбиоз.
Состояние выраженного дисбиоза характеризуется следующими показателями:
Этиологическая структура выявленного дисбаланса:
Анаэробный, если дисбаланс вызван анаэробными микроорганизмами: Gardnerella vaginalis /Prevotella bivia/Porphyromonas spp; Atopobium vaginae; Eubacterium spp; Sneathia spp /Leptotrihia spp/Fusobacterium spp; Megasphera spp/Veilonella spp/Dialister spp; Lachnobacterium spp/Clostridium spp; Mobiluncus spp/Corynebacterium spp; Peptostreptococcus spp
Аэробный, если дисбаланс, вызван аэробной микрофлорой: Enterobacteraceae, Streptococcus spp и Staphylococcus spp
Смешанный если дисбаланс, вызван любым сочетанием аэробной, анаэробной флоры и грибами рода Candida.
Инфекционный процесс, вызванный грибами рода Candida, может протекать без дисбиотических нарушений со стороны условно-патогенной флоры, а также может сочетаться с дисбиозом.
Фемофлор абсолютный нормоценоз что значит
ФГБУ «Поликлиника №1» Управления Делами Президента РФ
ФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия
Нормоценоз. Бактериальный вагиноз. Комплексная лабораторная диагностика бактериального вагиноза: современное состояние проблемы
Журнал: Лабораторная служба. 2013;(1): 3-24
Кудрявцева Л. В., Гущин А. Е. Нормоценоз. Бактериальный вагиноз. Комплексная лабораторная диагностика бактериального вагиноза: современное состояние проблемы. Лабораторная служба. 2013;(1):3-24.
Kudriavtseva L V, Gushchin A E. Normocenosis. Bacterial vaginosis. Comprehensive laboratory diagnosis of bacterial vaginosis: state-of-the-art. Laboratory Service. 2013;(1):3-24.
ФГБУ «Поликлиника №1» Управления Делами Президента РФ
ФГБУ «Поликлиника №1» Управления Делами Президента РФ
ФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия
Нормальная микрофлора влагалища женщин репродуктивного возраста подразделяется на облигатную (резидентная, индигенная), факультативную и транзиторную.
В случае нарушения микроэкологии генитального тракта, которое может происходить при воздействии на организм женщины разнообразных неблагоприятных внешних (экзогенных) или внутренних (эндогенных) факторов, таких как стрессовые ситуации, снижение иммунного статуса, гормональные нарушения, лечебные мероприятия и т.д., создаются и поддерживаются условия, приводящие к снижению колонизационной резистентности во влагалище по отношению к заселению его патогенными и условно-патогенными микроорганизмами. В результате этого может произойти внедрение транзиторной патогенной микрофлоры или дополнительное внедрение условно-патогенных микроорганизмов, представителей нормальной микрофлоры влагалища женщин репродуктивного возраста, в слизистую оболочку его стенки с последующей транслокацией в мочевыводящие пути, цервикальный канал и другие органы и ткани 7.
Антибактериальная терапия, с успехом используемая для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, в то же время может привести к нарушению как микроэкологии влагалища, так, собственно, и любого биотопа макроорганизма, например толстой кишки, или способствовать усилению степени уже существующих нарушений микроэкологии.
Инфекционно-воспалительные заболевания женских половых органов занимают особое место в структуре общей заболеваемости. Их значимость обусловлена тем, что эти заболевания затрагивают органы и ткани, относящиеся к репродуктивной системе, а следовательно, могут оказывать непосредственное влияние на репродуктивную функцию.
Нормоценоз
Современные представления о составе микрофлоры влагалища, ее качественные и количественные характеристики основаны в первую очередь на данных микробиологического исследования секрета влагалища и смывов с его слизистой оболочки. Совершенствование способов культивирования различных видов микроорганизмов на искусственных питательных средах, методов выделения чистой культуры и ее идентификации привело к изменению мнения о составе микрофлоры влагалища и критериях нормы.
Было установлено, что наряду с лактобактериями в составе нормальной микрофлоры влагалища могут присутствовать и условно-патогенные микроорганизмы. Появление в клинической микробиологической практике в начале 70-х годов ХХ века техники анаэробного культивирования привнесло существенные изменения в понятие «нормоценоза» влагалищного биотопа. Совершенствования анаэробной, а чуть позже и микроаэрофильной техник культивирования бактерий с их последующей идентификацией позволило заметно расширить спектр микроорганизмов, выявляемых при изучении микрофлоры влагалища.
В настоящее время не вызывает сомнения тот факт, что нормальная микрофлора влагалища у здоровых женщин репродуктивного возраста характеризуется большим разнообразием видов бактерий, жизнедеятельность которых во многом зависит от их способности к адгезии на клетки эпителия влагалища и возможности их конкуренции между собой за места обитания и продукты питания. Микрофлора влагалища здоровых женщин репродуктивного возраста строго индивидуальна и может даже в состоянии нормы подвергаться изменениям в зависимости от фазы менструального цикла. Кроме того, понятие «нормы» может быть различным для разных возрастных, этнических групп и даже географических зон 13.
Микроэкология влагалища во многом обусловлена эмбриональным происхождением и гистоморфологическим строением. Влагалище покрыто многослойным неороговевающим плоским эпителием, который не содержит желез. Делящиеся клетки базального слоя эпителия созревают в процессе их продвижения к просвету влагалища. Процессы физиологического созревания эпителиоцитов, их слущивания и толщина поверхностного слоя подвержены циклическим изменениям в ответ на действие половых гормонов.
Таким образом, возможные гормональные изменения на протяжении менструального цикла и жизни женщины (пубертат, менопауза, беременность) определяют интенсивность ферментативных процессов во влагалище и оказывают влияние на состояние его микрофлоры.
В норме влагалище у новорожденных девочек в первые часы жизни стерильно. К концу первых суток после рождения происходит его колонизация аэробными и факультативно-аэробными микроорганизмами. Через несколько дней в вагинальном эпителии происходит накопление гликогена, который является идеальным субстратом роста лактобактерий, и в вагинальной микрофлоре у новорожденных девочек начинают преобладать лактобактерии. Гормоны яичников, стимулируя рецепторную активность вагинального эпителия, также способствуют активной адгезии лактобактерий на его поверхности. Лактобактерии, в свою очередь, расщепляют гликоген с образованием молочной кислоты. Это приводит к сдвигу рН вагинального содержимого в кислую сторону (до 3,8-4,5) и ограничению роста и размножения микроорганизмов, чувствительных к кислой среде.
Через 3 нед после рождения у девочек происходит полное метаболизирование материнских эстрогенов. Эпителий становится тонким. Содержание гликогена в нем уменьшается. Это приводит к снижению количества микрофлоры, прежде всего лактобактерий, а также к снижению уровня органических кислот, которые продуцируются этими бактериями. В результате снижения уровня органических кислот происходит повышение рН вагинальной среды с 3,8-4,5 до 7,0. В микрофлоре начинают доминировать строго анаэробные бактерии.
Начиная со 2-го месяца жизни и весь пубертатный период вплоть до активации овариальной функции происходит снижение общего количества микроорганизмов во влагалище у девочек по сравнению с периодом новорожденности [18].
В пубертатном периоде, с момента активации овариальной функции, в организме у девушек появляются «собственные» эндогенные эстрогены, под влиянием которых в клетках эпителия влагалища накапливается гликоген и происходит формирование так называемого эстраген-стимулированного эпителия. На поверхности эпителиоцитов влагалища увеличивается число рецепторных участков, предназначенных для адгезии лактобактерий. Увеличивается и толщина эпителиального слоя.
С этого момента лактобактерии вновь становятся доминирующими микроорганизмами во влагалище и в последующем сохраняют это положение на протяжении всего репродуктивного периода у женщин. Метаболизм лактобактерий способствует стабильному сдвигу рН вагинальной среды в кислую сторону до 3,8-4,5 [19]. В вагинальной среде повышается окислительно-восстановительный потенциал, и это создает неблагоприятные условия для роста и размножения строго анаэробных микроорганизмов.
У здоровых женщин репродуктивного возраста эстрогены воздействуют на эпителий влагалища в фолликулярную, лютеиновую и секреторную фазы. В связи с этим частота высеваемости и количество строго анаэробных и большинства аэробных представителей нормальной микрофлоры влагалища выше в пролиферативной фазе, чем в секреторной. Поэтому наибольшую информацию о количественном и качественном составе микрофлоры можно получить на 2-14-й день менструального цикла [20]. Наименьшее количество микроорганизмов во влагалище определяется в период менструации [17]. Уровень лактофлоры при этом остается постоянным.
Физиологические и биохимические изменения в генитальном тракте во время беременности приводят к тому, что микрофлора влагалища становится более однородной. В течение беременности концентрация гликогена во влагалище у женщин увеличивается. Создаются благоприятные условия для жизнедеятельности лактобактерий, количество которых во влагалище беременных женщин значительно выше, чем небеременных 23. В то же время происходит снижение количества бактероидов и других неспорообразующих строгих анаэробов [24], а также аэробных бактерий [16]. Эти изменения достигают пика в III триместре беременности [25], что в последующем снижает вероятность контаминации плода условно-патогенными микроорганизмами при его прохождении через родовые пути матери [26].
Во время родов происходит первичная контаминация плода, в норме стерильного до рождения, микрофлорой влагалища матери. Состав микрофлоры влагалища роженицы в последующем определяет состав микрофлоры конъюнктивы, желудочного аспирата, кожных покровов новорожденного, которая идентична микрофлоре родового канала матери, а риск развития инфекционного процесса у новорожденных находится в прямой зависимости от степени обсемененности околоплодных вод [26, 27].
Состояние микрофлоры влагалища матери оказывает существенное влияние на формирование микробиоценоза кишечника ребенка и на характер течения периода новорожденности.
При наступлении менопаузы в генитальном тракте существенно снижаются уровни эстрогенов и, соответственно, гликогена. Снижаются количества лакто- и бифидобактерий. В этот период у женщин рН вагинальной среды приобретет нейтральные значения. Качественный состав микрофлоры становится скудным. Понижается общий уровень бактерий. В микрофлоре влагалища женщины в состоянии менопаузы начинают преобладать облигатно-анаэробные бактерии [27, 28].
Среди представителей облигатных анаэробов с высокой частотой (30-90%) обнаруживают группу Peptostreptococcus, включающую в себя всех членов рода, ранее известных как Peptococcus (за исключением P. niger) и все грамположительные анаэробные кокки, ранее идентифицированные как Gaffkya anaerobia.
Микроаэрофилы во влагалище здоровых женщин репродуктивного возраста помимо лактобактерий представлены G. vaginalis. По данным разных авторов, G. vaginalis встречается в 6-60% случаев [14, 16, 25].
Таким образом, определяющим фактором состояния вагинального микробиоценоза является лактофлора, ее концентрация и совокупность свойств [24, 36, 37].
В норме количественный уровень порфиромоносов, вейлонелл и фузобактерий не превышает 10 3 КОЕ/мл, а бактероидов и превотелл 10 4 КОЕ/мл [39].
Патогенные свойства строго анаэробных грамотрицательных бактерий связаны с их ферментативными свойствами. Так, у B. fragilis выявлены гиалуронидаза, коллагеназа, фибринолизин, иммуноглобулинпротеазы, гепариназа и сиалидаза.
B. fragilis обладают и другими факторами патогенности, например капсульным полисахаридом. Кроме того, бактероиды группы «fragilis» способны к продукции каталазы, что позволяет им противостоять действию Н2О2, вырабатываемой лактобактериями. Различные протеазы и коллагеназы были найдены у бактерий рода Porphyromonas. Протеазы и фибринолизин выявлены также у различных видов рода Prevotella. Fusobacterium necrophorum обладают способностью синтезировать гемолизин и факторы агрегации тромбоцитов.
У бактероидов, фузобактерий, а также у анаэробных стрептококков и гарднерелл была выявлена высокая способность к продукции фосфолипазы А2, которая, в свою очередь, способна активировать продукцию простагландинов путем освобождения арахидоновой кислоты из ее эфирной формы. У беременных женщин бактериальные протеазы и липазы могут воздействовать на хорионамниотическую оболочку, приводя ее к разрыву. Нарушение целостности хорионамниотической оболочки в совокупности с увеличением концентрации простагландинов в амниотической жидкости способно инициировать преждевременные роды [40, 41].
Органические кислоты, продуцируемые грамотрицательными анаэробами, а также бактериями рода Mobiluncus, в частности янтарная кислота, ингибируют функциональную активность полинуклеарных нейтрофилов, с чем связывают малое количество последних или их полное отсутствие в выделениях из влагалища при БВ.
Количество G. vaginalis нередко достигает 10 6 КОЕ/мл в вагинальном отделяемом. G. vaginalis обладают выраженной способностью к адгезии на поверхности эпителиоцитов влагалища. Кроме того, G. vaginalis могут продуцировать токсические биопродукты, к которым относятся муколитические ферменты и гемолизин, являющийся также лейкотоксическим фактором.
Генитальные микоплазмы и стафилококки встречаются в количестве не более 10 4 КОЕ/мл [42, 43].
Инфицирование новорожденных S. agalactiae может произойти во время родов при прохождении через родовые пути матери в случае преждевременного разрыва плодных оболочек или при акушерских манипуляциях, сопровождающих сложные роды. Инфицирование новорожденных стрептококками этого вида может также происходить позднее при контаминации госпитальными штаммами. Стрептококки этого вида способны вызывать тяжелые заболевания органов дыхания, менингиты, септицемии, нередко приводящие к летальному исходу [16, 25]. Зеленящие стрептококки могут быть причиной постоперационных воспалительных осложнений. Энтерококки часто обнаруживаются при воспалительных заболеваниях мочеполовой системы.
Грибы рода Candida определяются в количестве до 10 4 КОЕ/мл, не вызывая патологических процессов. Количество дрожжеподобных грибов может повышаться при беременности. Это связывают с тем, что при физиологической супрессии клеточного иммунитета, происходящей у беременных женщин и направленной на исключение возможности отторжения развивающегося плода, создаются благоприятные условия для роста и размножения дрожжеподобных грибов. Кроме того, C. albicans обладают способностью прикрепляться к эпителиоцитам влагалища при помощи специальных поверхностных структур, а также вырабатывать глиотоксин, который способен нарушать жизнеспособность и функцию человеческих лейкоцитов. С другой стороны, было обнаружено что C. albicans могут вырабатывать, так называемый, антинейссериа-фактор, который способен подавлять размножение и колонизацию влагалища N. gonorrhoeae [45].
Таким образом, нормальная микрофлора влагалища является динамичной популяцией различных микроорганизмов с преобладанием в ней молочно-кислых бактерий, формирующей колонизационную резистентность влагалищного биотопа, выполняющей защитную, ферментативную, витаминообразующую, иммуностимулирующую функции.
Бактериальный вагиноз
До определенного времени любой воспалительный процесс во влагалище, при котором не определялся этиологический агент воспаления, относился к неспецифическим вагинитам. В 1955 г. H. Gardner и C. Dukes описали синдром нарушения микрофлоры влагалища у пациенток с так называемым неспецифическим бактериальным вагинитом, при котором наблюдались снижение количества молочно-кислых бактерий и колонизация слизистой влагалища новыми, неизвестными ранее микроорганизмами, которые получили название Haemophilus vaginalis. В 1963 г. этот микроорганизм был переименован в Corinebacterium vaginitis, а в 1980 г. ему присвоили имя Gardnerella vaginalis в честь H. Gardner, который впервые выделил и описал эти бактерии. Это привело к появлению термина «гарднереллез», подразумевая, что этиологическим агентом такого состояния является G. vaginalis. Однако позднее было установлено, что G. vaginalis выявляется не только у пациенток с неспецифическими вагинитами, но и у приблизительно 40% здоровых женщин репродуктивного возраста и что G.vaginalis не единственный возбудитель гарднереллеза [40, 51-53].
Эпидемиология бактериального вагиноза
Эпидемиология БВ в настоящее время во многом остается неясной. С одной стороны, высокая частота обнаружения G. vaginalis у здоровых женщин позволяет рассматривать эти микроорганизмы как составную часть нормальной микрофлоры влагалища. В пользу эндогенного происхождения БВ свидетельствуют следующие факты: высокая частота обнаружения G. vaginalis у женщин, использующих внутриматочные спирали и пероральные контрацептивы, а также высокая частота обнаружения G. vaginalis и развитие клинических симптомов БВ у беременных женщин, в послеродовом, послеабортном и менопазуальном периодах, что, вероятно, связано с напряжением адаптационных возможностей макроорганизма [9, 56]. С другой стороны, в пользу полового пути передачи БВ свидетельствуют следующие факторы: одновременное выделение G. vaginalis из половых путей женщин, страдающих БВ, и от их сексуальных партнеров, высокая частота реинфекций у излеченных женщин, половые партнеры которых не лечились одновременно, достоверные случаи выявления БВ у женщин после половых контактов с мужчинами, у которых обнаружены G. vaginalis [57, 58].
Отсутствие единого мнения по вопросу о путях передачи БВ, по-видимому, связано с тем, что одной передачи микроорганизмов недостаточно для того, чтобы вызвать БВ. Скорее всего, для его развития необходимо наличие в том числе и предрасполагающих факторов, таких как: использование антибактериальных препаратов, длительное использование внутриматочных или пероральных контрацептивов, перенесенные ранее воспалительные заболевания урогенитального тракта, нарушение гормонального статуса, сопровождающееся нарушением менструального цикла, преимущественно по типу олигоменореи или аменореи, изменение состояния местного иммунитета, воздействие малых доз ионизирующего излучения, стрессовые воздействия на организм и т.д.
Этиология бактериального вагиноза
В настоящее время достаточно хорошо изучен характер микрофлоры влагалища при БВ и спектр микроорганизмов, участвующих в его развитии (табл. 3).
Так, при БВ происходит резкое снижение количества или полное отсутствие лактобактерий, продуцирующих Н2О2, увеличение количества G. vaginalis и анаэробных бактерий (Mobiluncus spp., Prevotella spp., Bacteroides spp., Fusobacterium spp., Peptostreptococcus spp., а также увеличение количества капнофилов, таких как M. hominis, U. urealyticum. Кроме того, при БВ увеличивается количество не продуцирующих Н2О2 анаэробных лактобактерий, что в свою очередь приводит к возникновению определенных симптомов БВ. Снижение концентрации факультативных лактобактерий способствует уменьшению количества молочной кислоты, снижению кислотности влагалищного содержимого и росту анаэробов.
Обнаружение при БВ небольшого количества грибов рода Candida обусловлено, по-видимому, преобладанием в количественном отношении бактериальной флоры, которая является достаточно сильным антагонистом для мицетов из-за продукции разнообразных бактериоцинов, без которых выживание бактерий в условиях конкуренции невозможно.
Появление в клинической лабораторной практике молекулярно-биологических методов диагностики, позволяющих выявлять в том числе плохо культивируемые и некультивируемые микроорганизмы позволило до некоторой степени расширить наше представление об этиологии БВ.