Фагоцитарная активность нейтрофилов в мазке что это
Гинекологический мазок «на флору»: на что смотреть, и как понять
Большинству женщин мазок «на флору» знаком, как самый «простой» гинекологический анализ. Однако исследование куда «полезнее», чем может казаться. И всего несколько (а то и одно) отклонений способны подсветить значимые проблемы, еще до появления каких-либо симптомов. Так как же понять полученные результаты? Рассказываем по пунктам.
1. Эпителий
Как известно, любой живой объект в природе имеет ограниченный срок жизни, по истечении которого он погибает «от старости».
Эпителий в гинекологическом мазке – это и есть слущенные «старые» клетки слизистой оболочки влагалища, цервикального или уретры (в зависимости от оцениваемого локуса). Которые могут присутствовать в материале в умеренных количествах.
Превышение нормативных пределов («много» или «обильно») может указывать на:
Уменьшение или отсутствие эпителия в мазке – на атрофические изменения, недостаток эстрадиола или избыток андрогенов.
Кроме того, ввиду зависимости эпителия от уровня половых гормонов, его количество в материале может сильно меняться в зависимости от дня цикла, начиная с единичного «в поле зрения» в самом начале – до умеренного и даже большого количества ближе к овуляции и во время нее.
А появление в мазке так называемых «ключевых клеток» (эпителий, «облепленный» мелкими кокковыми бактериями) – является маркером бактериального вагиноза.
2. Лейкоциты
«Норма» лейкоцитов в мазке также сильно зависит от стадии цикла и уровня половых гормонов, а также исследуемого локуса.
Так, за «максимум» для:
Повышение показателя – очевидно, свидетельствует о воспалении, а полное отсутствие может иметь место в норме в самом начале цикла.
Слизь
Результат «отсутствует», «мало» или «умеренно» для этого показателя является нормой, что тоже связано с индивидуальными особенностями гормонального фона и циклом.
А вот «много» слизи в мазке – может свидетельствовать о том, что мазок взят в середине цикла, дисбиотических изменениях или избытке эстрогенов. Поэтому требует внимания специалиста или, как минимум, контроля в динамике.
Флора
Преобладающей флорой женских половых путей в норме у женщин репродуктивного возраста, как известно, являются лактобактерии (или палочки Дедерлейна). Количество которых может быть от умеренного до обильного, в том зависимости, в том числе, от фазы менструального цикла.
Патологические элементы
Присутствия мицелия грибов, трихомонад, диплококков (в том числе и возбудитель гонореи), лептотрикса, мобилункуса и прочих патогенных микроорганизмов в нормальном мазке не допускается, даже в минимальном количестве. А их выявление – серьезный повод незамедлительно обратиться за лечением.
Цитологическая диагностика заболеваний шейки матки
Цитологическое исследование мазков из шейки матки позволяет оценить состояние слизистой оболочки, наличие или отсутствие признаков патологических процессов (реактивных, предопухолевых, опухолей). При выявлении другими лабораторными методами инфекционного агента (вирус папилломы человека, бактериальные и паразитарные инфекции), цитологический метод позволяет оценить реакцию организма на инфекционный агент, наличие или отсутствие признаков повреждения, пролиферации, метаплазии или трансформации эпителия. Возможно также при исследовании мазка определить причину изменений эпителия (наличие воспаления с ориентировочным или уверенным определением патогенной микробиоты (микрофлоры), патологических процессов, связанных с гормональным, лекарственным, механическим, лучевым воздействием на организм женщины и шейку матки, состояний, чреватых опасностью возникновения дисплазии и рака шейки матки, а при их развитии установить правильный диагноз. В связи с этим цитологическое исследование применяют как при скрининге (мазки с визуально нормальной шейки матки), так и при наличии видимых при гинекологическом осмотре изменений слизистой оболочки.
Получение материала
Рак шейки матки чаще всего развивается в зоне трансформации, ему предшествуют фоновые процессы и внутриэпителиальные поражения (дисплазия эпителия), которые могут располагаться на небольших участках, поэтому важно, чтобы материал был получен со всей поверхности шейки матки, особенно из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия. Число измененных клеток в мазке бывает различным, и если их мало, то увеличивается вероятность, что патологические изменения могут быть пропущены при просмотре препарата. Для эффективного цитологического исследования необходимо учитывать:
Материал из шейки матки должен брать врач-гинеколог или (при скрининге, профилактическом осмотре) хорошо обученная медицинская сестра (акушерка).
Важно, чтобы в мазок попадал материал из зоны трансформации, так как около 90% опухолей исходит из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия и зоны трансформации и только 10% из цилиндрического эпителия цервикального канала.
С диагностической целью материал получают раздельно из эктоцервикса (влагалищной порции шейки матки) и эндоцервикса (цервикального канала) с помощью шпателя и специальной щетки (типа Cytobrush). При проведении профилактического осмотра используют Cervex-Brush, различные модификации шпателя Эйра и другие приспособления для получения материала одновременно из влагалищной части шейки матки, зоны стыка (трансформации) и цервикального канала.
Перед получением материала шейку матки обнажают в “зеркалах”, дополнительных манипуляций не проводят (шейку не смазывают, слизь не удаляют; если слизи много – ее аккуратно снимают ватным тампоном, не надавливая на шейку матки.). Щетку (шпатель Эйра) вводят в наружный зев шейки матки, осторожно направляя центральную часть приспособления по оси цервикального канала. Далее ее наконечник поворачивают на 360° (по часовой стрелке), достигая тем самым получения достаточного числа клеток из эктоцервикса и из зоны трансформации. Введение инструмента выполняют очень бережно, стараясь не повредить шейку матки. Затем щетку (шпатель) выводят из канала.
Приготовление препаратов
Перенос образца на предметное стекло (традиционный мазок) должен происходить быстро, без подсушивания и потери прилипших к инструменту слизи и клеток. Обязательно перенести на стекло материал с обеих сторон шпателя или щетки.
Если предполагается приготовление тонкослойного препарата с помощью метода жидкостной цитологии, головку щетки отсоединяют от ручки и помещают в контейнер со стабилизирующим раствором.
Фиксация мазков выполняется в зависимости от предполагаемого метода окрашивания.
Окрашивание по Папаниколау и гематоксилин-эозином наиболее информативны в оценке изменений эпителия шейки матки; любая модификация метода Романовского несколько уступает этим методам, однако при наличии опыта позволяет правильно оценить и характер патологических процессов в эпителии и микрофлору.
Клеточный состав мазков представлен слущенными клетками, находящимися на поверхности эпителиального пласта. При адекватном получении материала с поверхности слизистой оболочки шейки матки и из цервикального канала в мазок попадают клетки влагалищной порции шейки матки (многослойный плоский неороговевающий эпителий), зоны стыка или трансформации (цилиндрический и, при наличии плоскоклеточной метаплазии, метаплазированный эпителий) и клетки цервикального канала (цилиндрический эпителий). Условно клетки многослойного плоского неороговевающего эпителия принято делить на четыре типа: поверхностные, промежуточные, парабазальные, базальные. Чем лучше выражена способность эпителия к созреванию, тем более зрелые клетки попадают в мазок. При атрофических изменениях на поверхности эпителиального пласта расположены менее зрелые клетки.
Интерпретация результатов цитологического исследования
Наиболее распространенная в настоящее время – классификация Bethesda (The Bethesda System), разработанная в США в 1988 г, в которую вносили несколько изменений. Классификация создана для более эффективной передачи информации из лаборатории врачам клинических специальностей и обеспечения стандартизации лечения диагностированных нарушений, а также последующего наблюдения за больными.
В классификации Bethesda выделяют плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой и высокой степени (squamous intraepithelial lesions of low grade and high grade – LSIL и HSIL) и инвазивный рак. Плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой степени включают изменения, связанные с папилломавирусной инфекцией и слабой дисплазией (CIN I), высокой степени – умеренную дисплазию (CIN II), тяжелую дисплазию (CIN III) и внутриэпителиальный рак (cr in situ). В этой классификации имеются также указания на специфические инфекционные агенты, вызывающие заболевания, передавае мые половым путем.
Для обозначения клеточных изменений, которые трудно дифференцировать между реактивными состояниями и дисплазией предложен термин ASCUS – atypical squamous cells of undetermined significance (клетки плоского эпителия с атипией неясного значения). Для клинициста этот термин мало информативен, однако он нацеливает врача на то, что данная пациентка нуждается в обследовании и/или в динамическом наблюдении. В классификацию Bethesda в настоящее время введен также термин NILM – no intraepithelial lesion or malignancy, объединяющий норму, доброкачественные изменения, реактивные изменения.
Так как данные классификации используются в практике врача-цитолога, ниже приведены параллели между классификацией Bethesda и классификацией, распространенной в России (Табл. 22). Цитологическое стандартизованное заключениепо материалу из шейки матки (форма № 446/у), утверждено приказом Минздрава России от 24.04.2003 № 174.
Причины получения неполноценного материала различны, поэтому цитолог перечисляет типы клеток, обнаруженные в мазках и по возможности указывает причину, по которой материал признан неполноценным.
Повышены нейтрофилы в крови: причины, что значит и о чем говорит
Один из показателей нормальной работы иммунной системы — количество нейтрофилов в крови. Число этих клеток можно определить по общему развернутому анализу крови. Повышение и снижение показателей свидетельствует о наличии серьезных патологических процессов в организме.
Что такое нейтрофилы?
Нейтрофилы — разновидность лейкоцитов, которые поддерживают работоспособность иммунной системы. Синтезируются в красном косном мозге. Эти клетки обнаруживают патогенные микроорганизмы, поглощают и переваривают их, после чего нейтрофилы гибнут. Этот процесс называется фагоцитоз. Отмершие клетки образуют массу, которая называется гной.
По степени созревания выделяют 6 видов нейтрофилов. Незрелые — миелобласты, промиелоциты, миелоциты, палочкоядерные клетки и метамиелоциты. Зрелые — сегментоядерные нейтрофилы, которые содержат ядро, разделенное на несколько сегментов. Эти клетки эффективнее справляются с инфекцией, чем незрелые.
Нормы количества нейтрофилов у мужчин и женщин
Количество нейтрофилов в крови у мужчин и женщин составляет 40-70% от общего числа лейкоцитов. Для оценки состояния здоровья значение имеет уровень палочкоядерных и сегментоядерных клеток.
Нормальные значения (в % от общего числа лейкоцитов):
При тяжелых инфекционных заболеваниях в крови присутствует много незрелых нейтрофилов. Это связано с тем, что для борьбы с большим количеством патогенов организм задействует не до конца созревшие клетки. В крови здоровых людей выявляют преимущественно только зрелые нейтрофилы.
У детей первого года жизни количество палочкоядерных клеток несколько выше, чем у взрослых. Меньше всего сегментоядерных клеток выявляют у детей 4-5 лет — в пределах 35-55%.
Причины повышения показателей
Повышение количества нейтрофилов (нейтрофилез, нейтрофилия) наблюдается при различных травмах и заболеваниях. Основная причина — очаговые и генерализованные очаговые инфекции.
Нейтрофилез диагностируют, если содержание нейтрофилов в крови у взрослого превышает 6500 единиц в 1 мкл крови. При этом выделяют относительную форму патологии, при котором нейтрофилов более 75%, но общее количество лейкоцитов в норме. И абсолютный нейтрофилез — одновременно повышен уровень нейтрофилов и лейкоцитов.
При каких болезнях повышается количество нейтрофилов:
Спровоцировать увеличение количества нейтрофилов может длительный прием гормональных препаратов, употребление в пищу консервированной пищи, стресс, чрезмерные физические нагрузки. Физиологический нейтрофилез может быть вызван воздействием тепла и холода, перееданием, предменструальным синдромом.
Нейтрофилия во время беременности не считается патологией. Иммунная система воспринимает плод как чужеродный организм, что приводит к увеличению количества все видов лейкоцитов. Но значительное превышение показателей может быть признаком эклампсии. Повышение уровня нейтрофилов наблюдается и после родов.
Снижение уровня нейтрофилов чаще всего возникает при аутоиммунных патологиях, заболеваниях крови и лучевой болезни, вирусном гепатите, гриппе. Количество клеток уменьшается при приеме НПВС, антибиотиков, противовирусных средств, лекарств для лечения диабета, болезней щитовидной железы, малярии.
Уровень нейтрофилов определяют по общему анализу крови, в бланке эти клетки обозначают буквами NEUT.
Для анализа берут венозную кровь натощак, ужин должен быть за 8 часов до забора биоматериала. За 48 часов до обследования нужно отказаться от употребления алкоголя, острой, жирной и жаренной пищи, избегать чрезмерных физических нагрузок и стрессов.
Как распознать нейтрофилию?
Нейтофилия не является самостоятельным заболеванием, поэтому характерные симптомы патологии выявить сложно. Признаки зависят от основной болезни, на фоне которой произошел скачок нейтрофилов.
Как нормализовать показатели?
Изменение уровня нейтрофилов — признак воспаления, отравления, серьезных травм и болезней. Чтобы точно установить причину увеличения уровня, проводят полное обследование. Это бакопсев различных биологических жидкостей для выявления типа возбудителя инфекции, УЗИ внутренних органов, рентген грудной клетки, ЭКГ, гистологическое исследование. На основании результатов диагностики врач назначает лечение.
При выраженном нейтрофилезе могут назначить следующие препараты:
При воспалении аппендикса, очагов некроза и гнойников необходимо оперативное вмешательство. Дополнительно назначают диетотерапию — в рационе необходимо уменьшить количество мясных блюд, консервов и копченостей. Основа меню — овощи и фрукты в любом виде.
Специфическое лечение не требуется, если уровень нейтрофилов увеличился на фоне стресса или физического переутомления.
Изменение показателей нейтрофилов свидетельствует о различных патологиях, поэтому не стоит заниматься самодиагностикой, пытаться увеличить или уменьшить значения самостоятельно. Правильно подобрать методы лечения сможет только врач после осмотра и диагностики.
Фагоцитарная активность нейтрофильных гранулоцитов у больных с воспалительными заболеваниями кишечника в зависимости от клинических характеристик заболевания
Статья посвящена изучению функциональной активности нейтрофилов для оценки активности воспаления и распространенности патологического процесса у больных с воспалительными заболеваниями кишечника. Установлено, что рецидив язвенного колита сопряжен с нарушениями фагоцитарного звена иммунной системы — снижением активности и интенсивности фагоцитоза, отсутствием возрастания метаболической активности нейтрофилов. Нарушение процессов фагоцитоза у больных язвенным колитом ассоциированы с распространением воспаления в кишечнике.
Phagocytic activity of neutrophilic granulocytes in patients with inflammatory bowel disease according to the clinical characteristics of the disease
The paper studies the functional activity of neutrophils to assess activity of inflammation and extensive pathological process in patients with inflammatory bowel disease. Found that recurrence of ulcerative colitis is associated with impaired phagocytes of immune system — reduction the activity and intensity of phagocytosis, no increase in the metabolic activity of neutrophils. Disturbance of phagocytosis in patients with ulcerative colitis associated with the spread of inflammation in the gut.
Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) характеризуются наличием воспалительно-деструктивных процессов в кишечнике и рецидивирующим течением [3]. Актуальность изучения этой патологии определяется неуклонным ростом заболеваемости и «омоложением» ВЗК, тяжестью местных и внекишечных проявлений [3]. Решающую роль в постановке диагноза язвенного колита (ЯК) и болезни Крона (БК) играют различные инструментальные методы исследования: эндоскопия, гистологическое исследование биоптатов слизистой оболочки, рентгеноконтрастное исследование кишечника [1]. Однако, для динамического контроля за состоянием больного с ВЗК в клинической практике необходимо более широкое использование неинвазивных диагностических методов [2]. Известно, что в развитии воспаления при ВЗК задействованы многочисленные механизмы тканевого и клеточного повреждения. Бактериальные и тканевые антигены вызывают стимуляцию Т- и В-лимфоцитов. При обострении ЯК выявляется дефицит иммуноглобулинов, что способствует проникновению микробов, компенсаторной стимуляции В-клеток с образованием иммуноглобулинов М и G. Дефицит Т-супрессоров приводит к усилению аутоиммунной реакции [4]. Усиленный синтез иммуноглобулинов М и G сопровождается образованием иммунных комплексов и активацией системы комплемента, который обладает цитотоксическим действием, стимулирует хемотаксис фагоцитов с последующим выделением медиаторов воспаления, вызывающих деструкцию эпителиальных клеток 5. Таким образом, от активности фагоцитоза зависит функция разрушения и выведения иммунных комплексов из организма. При этом важно, чтобы активность фагоцитоза и «переваривающая» способность нейтрофилов соответствовали возросшему количеству бактериальных и тканевых антигенов при ВЗК и не вызывали повреждения эпителия кишки. От достижения паритета между этими двумя составляющими – «защита от антигенов» и «аутоагрессия», очевидно, зависит активность воспалительного процесса в кишечнике, стойкость ремиссии, частота рецидивов, что подчеркивает актуальность исследований в этом направлении.
Цель работы: установить диагностическую значимость функциональной активности нейтрофилов для оценки активности воспаления и распространенности патологического процесса в кишечнике у больных с ВЗК.
В работе были использованы данные клинико-иммунологических исследований 36 больных ЯК, составляющих основную группу, и 11 условно здоровых (контрольная группа). В основной группе было 12 (33,3%) мужчин и 24 (66,7%) женщины, в контрольной – 4 (36,4%) мужчин и 7 (63,6%) женщин. Возраст пациентов основной группы колебался от 21 до 83 лет и в среднем составил 44,0±2,9 года. В контрольной группе возраст пациентов варьировал от 16 до 52 лет, в среднем соответствовал 26±2,94 года.
Клиническую активность заболевания оценивали с помощью балльной шкалы D. Rachmilewitz (1989). Сумма баллов от 0 до 4 соответствовала ремиссии заболевания, 5-10 баллов – низкой, 11-15 баллов – средней и более 16 баллов – высокой степени клинической активности ЯК.
В крови больных определяли абсолютное количество лейкоцитов (норма 4-9х10 9 /л), лимфоцитов (норма 1-4,5х10 9 /л), нейтрофилов (норма 1,5-7х10 9 /л). Для характеристики активности фагоцитоза рассчитывали процент фагоцитов, способных к активному захвату частиц (норма 70-95%). Интенсивность фагоцитоза отражали количеством частиц, поглощенных одним фагоцитом (норма 5-10). Спонтанный НСТ-тест указывал на степень раздражения фагоцитирующих клеток крови (норма – 35-55%.). Стимулированный НСТ-тест являлся аналогом антигенного раздражения в организме (норма 55-90%). Отличие между стимулированным и спонтанным тестом, в норме составляющее 1,4-1,9 раза, указывает на метаболический потенциал фагоцитов и фактически характеризует их киллерную способность.
Фагоцитарную активность фагоцитов оценивали по процентному содержанию нейтрофилов с поглощенными частицами латекса и фагоцитарному числу (количество поглощенных частиц). Метаболическую активность — по их способности восстанавливать нитросиний тетразолий в спонтанном и стимулированном HCТ-тесте. В основе данного метода лежит восстановление в цитоплазме нейтрофилов нитросинего тетразолия до диформазана под влиянием супероксидного аниона, образующегося при активации клетки. Диформазан имеет вид темно-синих или черных гранул, количество которых меняется в зависимости от выраженности кислородного взрыва. Для постановки использовались наборы НСТ-теста НПЦ «Медицинская иммунология», активацию нейтрофилов проводили латексом.
Статистический анализ результатов проводился с помощью программы STATISTICA 7.0 (StatSoft Inc., США). Исследованные величины были представлены в виде выборочного среднего значения ± ошибка выборочной средней. Достоверность различий средних величин оценивали с помощью t-критерия Стьюдента. Проверку на нормальность распределения оценивали с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Статистическое сравнение долей с оценкой достоверности различий выполняли с использованием критерия Пирсона c 2 с учетом поправки Йейтса на непрерывность. Во всех процедурах статистического анализа рассчитывали достигнутый уровень значимости (р), при этом критический уровень значимости принимался равным 0,05.
Показатели фагоцитоза у больных основной и контрольной групп представлены в таблице 1.
Показатели фагоцитоза у больных ЯК и в контрольной группе
Исследование фагоцитарной активности
Краткое описание:
Фагоциты являются одним из главных компонентов врождённого иммунитета. Они обеспечивают первую линию в защите организма от инфекции. В основе защитной функции лейкоцитов лежит фагоцитарный процесс, заключающийся в их способности распознавать, поглощать, убивать и переваривать чужеродные клетки. Как высокочувствительный индикатор нормы и патологии, характеристики фагоцитов служат полезным инструментом не только иммунологической, но и общеклинической диагностики. Данные по фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов (содержание клеток, фагоцитировавших при инкубации бактерии с флюоресцентной меткой) позволяют оценить резервные возможности этих клеток по поглощению и перевариванию чужеродных агентов.
Синонимы (rus): фагоцитоз, фагоцитарный индекс
Синонимы (eng): Phagocytic activity of leucocytes
Тип биоматериала: Венозная кровь.
Тип пробирки: вакутейнер с К3ЭДТА (цвет крышки: сиреневая)
Подготовка к исследованию:
• Не принимать пищу в течение 12 часов перед исследованием.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение за 30 минут до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.
Референсные значения: 40-90 у. е.
Интерпретация результата (снижение показателей):
Причины повышения
1. При бактериальных воспалительных процессах (норма)
2. Повышенное содержание лейкоцитов в крови (лейкоцитоз)
3. Аллергические реакции, аутоаллергические заболевания
Причины понижения
Может быть связано со сниженной продукцией фагоцитов, быстрым их распадом, нарушением подвижности, нарушением самого процесса поглощения инородного анегта, нарушением процессов его уничтожения и др. Все это говорит о снижении устойчивости организма к инфекции.
Чаще всего фагоцитарная активность снижается при:
1. На фоне тяжелых инфекций, интоксикаций, ионизирующего облучения (вторичный иммунодефицит)
2. Системных аутоиммунных заболеваний соединительной ткани (системная красная волчанка, ревматоидный артрит)
3. Первичных иммунодефицитов (синдром Чедиака-Хигаси, хроническая гранулематозная болезнь)
4. Хроническом активном гепатите, циррозе печени
5. Некоторых формах гломерулонефритов